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在动物饲养过程中,过去的几十年,CAP和TAP在兽医临床抗感染治疗中发挥了举足轻重的作用,但由于CAP存在严重的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症等疾病,随着公众对其潜在毒性、残留和耐药性的广泛关注,近些年来,包括中国在内的许多国家陆续禁止了它在兽医临床上的使用。
08-2021
常用的有机溶剂有乙酸乙酯、乙腈、甲醇和丙酮等,也可以进行不同比例混合后提取。提取溶剂中常加入无水硫酸钠、氯化钠等,除去样品中水分的同时,盐析蛋白质,提高提取效率。
超临界流体(supercritical fluid,SF)是处于临界温度(Tc)和临界压力(pc)以上,介于气体和液体之间的流体。SF具有气体和液体的双重特性,密度和液体相近,黏度与气体相近,但扩散系数约比液体大100倍。
对动物基质进行样品预处理,是保证残留检测结果可靠的前提。通常初步的提取液中CAPs浓度很低,还含有许多脂肪等共萃取物,这些共萃取物如果存在于最终的样品溶液中,不仅会损害检测仪器,还会降低柱效以及干扰检测结果,影响色谱分离及检测的正常进行。
MSPD可同时实现样品的均质、提取和净化。在MSPD中吸附剂与样品一起混合研磨,样品均匀分散于吸附剂键合相,形成一个独特的色谱固定相。吸附剂同时起着支持剂、分散剂、吸附剂、净化剂的作用,待测物在吸附剂、洗脱液和样品基质之间进行吸附与分配,最终达到萃取与净化双重效果。
当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程这种作用就会被记忆下来,当模板分子除去后,聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴,这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。MIT的发展为CAPs的前处理提供了新的净化手段。
目前AGs残留检测常用的测定方法主要有免疫分析法、微生物法和仪器分析法等。
微生物效价法是利用样品中抗生素抑制特定菌株的生长来检测抗生素的方法,是当前各国药典推荐的测定抗生素的主要方法。微生物法具有操作简单、花费少等优点,而且微生物法多利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,根据量反应平行线原理,比较标准品与供试品对接种试验菌产生抑菌圈的大小来定量确定残留量。
TLC作为一种定性鉴别AGs的方法,操作简单,分析结果直观。扫描密度计与TLC技术相结合产生了高效薄层色谱法(highperformance thin layer chromatography, HPTLC)。目前,正相和反相TLC均可检测链霉素、卡那霉素、庆大霉素和托普霉素等,分别在硅胶和C18板上分离药物。
HPLC常用于难挥发、强极性物质的分离检测,因其专一性强和灵敏度高,在药物检测中得到广泛的应用。AGs水溶性好、极性大且分子量高,特别适合于采用HPLC法检测。目前,利用液相色谱检测AGs的方法主要有紫外检测法、荧光检测法、电化学检测法、蒸发光散射检测法、化学发光检测等。
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