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对动物基质进行样品预处理,是保证残留检测结果可靠的前提。通常初步的提取液中CAPs浓度很低,还含有许多脂肪等共萃取物,这些共萃取物如果存在于最终的样品溶液中,不仅会损害检测仪器,还会降低柱效以及干扰检测结果,影响色谱分离及检测的正常进行。
08-2021
MSPD可同时实现样品的均质、提取和净化。在MSPD中吸附剂与样品一起混合研磨,样品均匀分散于吸附剂键合相,形成一个独特的色谱固定相。吸附剂同时起着支持剂、分散剂、吸附剂、净化剂的作用,待测物在吸附剂、洗脱液和样品基质之间进行吸附与分配,最终达到萃取与净化双重效果。
当模板分子(印迹分子)与聚合物单体接触时会形成多重作用点,通过聚合过程这种作用就会被记忆下来,当模板分子除去后,聚合物中就形成了与模板分子空间构型相匹配的具有多重作用点的空穴,这样的空穴将对模板分子及其类似物具有选择识别特性。MIT的发展为CAPs的前处理提供了新的净化手段。
目前AGs残留检测常用的测定方法主要有免疫分析法、微生物法和仪器分析法等。
微生物效价法是利用样品中抗生素抑制特定菌株的生长来检测抗生素的方法,是当前各国药典推荐的测定抗生素的主要方法。微生物法具有操作简单、花费少等优点,而且微生物法多利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,根据量反应平行线原理,比较标准品与供试品对接种试验菌产生抑菌圈的大小来定量确定残留量。
TLC作为一种定性鉴别AGs的方法,操作简单,分析结果直观。扫描密度计与TLC技术相结合产生了高效薄层色谱法(highperformance thin layer chromatography, HPTLC)。目前,正相和反相TLC均可检测链霉素、卡那霉素、庆大霉素和托普霉素等,分别在硅胶和C18板上分离药物。
HPLC常用于难挥发、强极性物质的分离检测,因其专一性强和灵敏度高,在药物检测中得到广泛的应用。AGs水溶性好、极性大且分子量高,特别适合于采用HPLC法检测。目前,利用液相色谱检测AGs的方法主要有紫外检测法、荧光检测法、电化学检测法、蒸发光散射检测法、化学发光检测等。
质谱仪是目前兽药残留分析中灵敏度最高的检测仪器,同时还可以进行化合物的结构鉴定。而色谱-质谱联用法是目前对复杂样品进行定性、定量分析的最佳方法。在兽药残留检测应用中,由于目标物浓度低、样品基质复杂,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术已成为残留分析的主要发展方向。
试样中的抗生素用磷酸溶液提取,三氯乙酸沉淀蛋白,用苯磺酸型和羧酸型固相萃取柱净化。液相色谱-串联质谱仪(ESI+)检测,外标法定量。
实验样品混合均匀,分出0.5kg作为试样。试样置于-18℃冰柜,避光保存。
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