牛、猪肝脏和肌肉中卡巴氧和喹乙醇及代谢物残留量测定线性范围和测定低限

本方法回收率和精密度试验，以不含CBX、DCBX、QCA和MQCA的猪肉，猪肝、牛肉、牛肝为添加基质，设定了0.5 μg/kg、1.0 μg/kg、2.0 μg/kg、5.0 μg/kg四个添加浓度，每个浓度进行十次试验，测得各种分析物的回收率汇总列表(见表15-6)。本方法的平均回收率为76%～ 97%，变异系数为2.9%～16.9%。

液相色谱-串联质谱法测定牛奶和奶粉中卡巴氧和喹乙醇代谢物残留量

用甲酸溶液消化试样，使牛奶和奶粉中天然存在的酶失活，然后加入蛋白酶水解，盐酸酸化，离心过滤后，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定卡巴氧代谢物喹噁啉-2-羧酸和喹乙醇代谢物3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留，内标法定量。

液相色谱-串联质谱法测定牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量

肌肉中安乃近代谢物残留用硫酸钠溶液(pH=7)提取，过滤后，经Bond Elut C18固相萃取柱或相当者净化后，用甲醇洗脱，氮气吹干。残渣用甲醇+水溶解，供液相色谱-串联质谱仪测定，内标法或外标法定量。

牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量测定步骤

每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质和内标物的保留时间之比，也就是相对保留时间，与基质混合标准工作溶液中对应的相对保留时间偏差在±2.5%之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1-5 规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。

牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量测定分析条件的选择

在安乃近的体内和体外的稳定性研究中，安乃近均被发现容易转化成活性产物4-甲基氨基安替比林。在体内研究中，安乃近被吸收进入血液后，迅速、完全地被代谢为活性产物MAA，再进入体循环，其药理作用主要由MAA产生。在体外研究中，Hakan等最近的研究发现在溶液中安乃近亦容易转化为MAA，影响其降解的主要因素包括浓度、温度和pH。

牛和猪肌肉中安乃近代谢物残留量测定线性范围和测定低限

按照本方法制备4种安乃近代谢物浓度分别为2.5ng/mL、12.5ng/mL、25.0ng/mL、50.0ng/mL和100ng/mL的基质混合标准溶液，在选定的条件下进行测定，以峰面积(Y轴)对相应的安乃近代谢物各组分浓度(X轴)作图，结果表明，测定的四种组分浓度与对应的峰面积值呈现良好的线性关系(见表14-5)，检出限均小于2.0μg/L。

液相色谱-串联质谱法测定牛奶和奶粉中安乃近代谢物残留量

牛奶和奶粉中安乃近代谢物残留量测定步骤

色谱柱：C18色谱柱，1.7um，50mm×2.1mm(内径)或相当者；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相、流速及梯度洗脱条件见表14-8。

牛奶和奶粉中安乃近代谢物残留量测定分析条件的选择

牛奶样品含有大量的蛋白质，它们能结合药物，因此对于某些药物的测定，必须先将与蛋白结合的药物游离之后再作进一步处理。因为样品含有大量的蛋白质，蛋白质在测定过程中会形成泡沫、浑浊或出现沉淀而干扰测定。蛋白质还会污染仪器或恶化测定条件，如直接进样用液相色谱分析含蛋白质的体液样品时，蛋白质会沉积在色谱柱上，这不仅影响柱效，而且大大缩短色谱柱的使用寿命。

牛奶和奶粉中安乃近代谢物残留量测定线性范围和测定低限

按照本方法制备4种安乃近代谢物浓度分别为1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、40.0ng/mL和100ng/mL的基质混合标准溶液，在选定的条件下进行测定，以峰面积(Y轴)对相应的安乃近代谢物各组分浓度(X轴)作图，结果表明，测定的四种组分浓度与对应的峰面积值呈现良好的线性关系(见表14-10)，检出限均小于2.0μg/L。