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为什么细胞培养需要二氧化碳?
CO2既是细胞代谢产物,也是细胞所需成分,它主要与维持培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境,pH为7.2~7.4,以不超出6.8~7.6为宜。在细胞培养过程中,随着CO2释放量的增多,培养基会变酸,因此常加入NaHCO3(与CO2溶于水后所形成的H2CO3构成一个缓冲对)来调节pH,以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气,以便于气体的交换。细胞培养所...
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什么是铜绿假单胞菌?
铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa)原称绿脓杆菌。在自然界分布广泛,为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。本菌存在的重要条件是潮湿的环境。铜绿假单胞菌的生物特性本菌是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一,有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛,在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。本菌...
生物实验中的常见问题
1、培养基配制时应注意的问题:(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量;(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分;(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏;(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。2、产品的保存:(1)干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。(2)亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷...
噬菌体是什么?
噬菌体是一类细菌特异性的病毒,它有典型的病毒形态和结构。噬菌体对宿主有高度的特异性,噬菌体的宿主范围是鉴别菌株的一个有用的特性,但并不是一个不变的特性。噬菌体的作用方式,是以尾鞘吸附到宿主细胞特定的受点上,向菌体内注射RNA,并在菌体内复制子代,最终类似蛭弧菌溶解宿主的方式,释放子代。噬菌体不能在停止新陈代谢的宿主内生长繁殖。噬菌体的检测噬菌体的分离可用平板接种法或肉汤培养物的裂解法。噬菌体的测定...
胎牛血清有什么作用?
胎牛血清作为细胞生长不可缺少的重要营养来源一直备受科研人员重视,那么胎牛血清在参与细胞培养实验都发挥着什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性...
如何预防实验室常见的细胞污染?
1.细胞污染的种类在细胞实验室里,细胞污染一般可分为微生物污染和真核生物污染。其中微生物污染包括真菌和酵母、细菌、支原体等。而真核生物一般是细胞系间的交叉污染。细菌、真菌或酵母的污染很容易辨识,直接可通过培养基颜色变化、显微镜下观察便可判断。如细菌污染后细胞培养基变黄色,而且镜下有小黑点,且有规律的运动。而酵母污染后培养基变紫色,镜下可见透明、且连成一串的圆形。但如果是支原体污染的话,由于开始支原...
怎样预防支原体污染的细胞培养?
细胞培养的过程中,支原体污染是一种常见且难以察觉的现象,可以在不知不觉中对细胞实验造成影响。那么,应该采取哪些措施预防支原体污染呢?1、提高实验室无菌操作技术在实验室中,熟练的技术人员应细心监督新来人员是否遵循无菌操作的规范,这可以帮助减少支原体污染的风险。强烈建议对所有细胞污染事故要进行记录和存档,以解决污染问题。2、检查培养基是否污染由于支原体污染的主要来源之一是从实验室外带进来的细胞,建议使...
溶液稀释是一步到位还是逐级稀释好?
实质被稀释溶液取样的绝对误差,对稀释后溶液浓度相对误差的贡献大小问题。如果注意到无论是体积还是质量,取样的时候都是产生的绝对误差就明白了。举例说明:溶液稀释100倍,假设取样误差是0.02ml,采取如下3种方式:方式1:一步到位稀释,取1ml浓溶液稀释到100ml,那么会造成稀释后稀溶液浓度存在2%的相对误差。方式2:分2次逐级稀释,每次稀释10倍,每次要取10ml浓溶液,稀释到100ml,取样误...
标准物质证书的16个小知识~
标准物质证书的内容其实非常多,要详细看懂标准物质证书,也不是太容易,大致来说包括下面17个方面的内容(有时候标准物质证书本身内容也不完全)1、定值机构的名称、地址该名称(常在证书上端以显著的字体写出)应当是对证书提供的信息负责的团体或组织的名称,如定值机构。除名称之外,还包括通讯地址、电话和传真号码,如果可能的话,也包括电子邮件地址。2、文件(证书)的标题应当有清晰明显的标题,例如,分析证书或测量...
影响试剂有效期的因素
一、试剂有效期的参考因素试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中,人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性,其实这是不对的。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期,化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限,这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关;要根据化学性质、保存条件等,再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。二、试剂的性质对有效期的影响化学试剂一般没有...
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