生物实验中的常见问题

1、 培养基配制时应注意的问题：

(1) 灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量；

(2) 琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分；

(3) 培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏；

(4) 含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。

2、 产品的保存：

(1) 干粉培养基：避光干燥，结块后不能使用。

(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等：冷冻保存，使用时，要常温解冻，避免水浴加热。

(3) 抗生素类：冷藏保存，温度过高会导致灵敏度的下降。

(4) 兔血浆：冷藏保存少量的红色不会影响结果。

3、 观察时间的掌握：按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察，时间过短或时间过长，单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基，时间短单菌落看不到卵磷脂环，时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此，时间过长，李氏菌使整个平板成黑色，不利于观察单个菌落。

4、 添加剂的添加：

(1) 温度的掌握。卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。

(2) 定量。过多会抑制一些目标菌，太少又导致杂菌的过度生长。

5、 培养温度的掌握：

(1) 真菌类。25-28℃培养

(2) 细菌类。李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。

(3) 其他一般在36℃左右