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如何预防实验室常见的细胞污染?

发布时间:2023-03-02 15:52 作者:aaaaa 浏览量:376

1.细胞污染的种类

在细胞实验室里,细胞污染一般可分为微生物污染和真核生物污染。其中微生物污染包括真菌和酵母、细菌、支原体等。而真核生物一般是细胞系间的交叉污染。细菌、真菌或酵母的污染很容易辨识,直接可通过培养基颜色变化、显微镜下观察便可判断。如细菌污染后细胞培养基变黄色,而且镜下有小黑点,且有规律的运动。而酵母污染后培养基变紫色,镜下可见透明、且连成一串的圆形。但如果是支原体污染的话,由于开始支原体生长缓慢,而且显微镜下难以看出,因此很难发现。真核细胞污染是指一种细胞污染了另外一种细胞,主要发生在操作不当,尤其是长时间进行某些细胞系的研究而传代时。目前越来越多的科研人员发现了细胞间污染这一被忽略的问题。据不完全统计,约有 15-20% 的细胞存在细胞间污染。

2.细胞污染对实验的影响

不管发生哪种类型的污染都会造成相同的结果,即必须重新做实验,因此浪费工作时间,增加实验成本,降低实验重复性。而且以污染细胞和未污染细胞为基础进行实验时,有可能得到的实验结果完全不同。更为严重的是,如果你所研究的细胞是另外一种细胞的话,那所做的工作会徒劳无功。

3.如何预防细胞污染

对于细胞培养实验室来说,最重要的是杜绝一切可能的污染源。污染的来源可分为直接和间接两类。直接污染指使用试剂带来的污染或者所培养的细胞已经被污染。间接污染可能来自于实验室、实验设备或者我们自己本身。因此,如何预防细胞污染的发生是细胞实验室日常工作的重中之重。

1、如果实验室引入一种新的细胞,或者一直培养保存的细胞,但对保存细胞从未检测过,就有可能给实验室带来污染。因此使用前先检测新引入细胞株,或检测保存细胞是否纯净无污染。

2、对于培养基等试剂的选择,必须在符合 GMP/GLP 规定的厂房生产,并且需要对血清进行常规污染检测,以及建立良好的分装习惯和体系。

3、实验室是否保持洁净,实验设备是否保持无菌,以及操作环节的正确操作,都可避免污染产生。因此必须遵照严格的无菌操作规范和管理。

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