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细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。
细胞培养基是细胞培养的基础,它为动物细胞的健康快速成长提供营养物质。所以只要用到细胞来制造生物技术产品,细胞培养基的重要作用就不可替代。
细胞培养基的种类繁多,细胞培养方式也较多,如何正确地使用培养基及很大程度地保持培养基的营养以维持细胞的生长,对每个培养者都很重要。培养基的使用依不同的培养基种类、培养方式、细胞种类的不同而存在差异。
细胞培养基的使用注意事项
1) 细胞培养用水一般为三蒸水(经石英蒸馏器蒸馏)或超纯水,医药生产上一般为注射用水。
2) 建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。
3) 溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。
4) 如需添加的组分较多时,某一组分完全溶解后,再添加另一组分。
5) 待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。
6) 所有成分完全溶解后,培养基应立即过滤或高压除菌,以免产生沉淀或有微生物污染。
7) 在过滤除菌时,一般情况下应调pH比所需值低0.1~0.2个单位,因过滤除菌后,pH值会升高约0.2。
8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。
9) 建议用1 N HCl或1 N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠来调对培养液的渗透压影响比较大。
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