色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品、流动相及使用频率有关，最主要的是与日常的维护密切相关。色谱柱的使用寿命，主要是根据柱效和柱压两个指标来衡量，如果一支色谱柱柱效太低，或者柱压太高，通常被认为该色谱柱的使用寿命已经结束。因此，延长色谱柱使用寿命的关键，是消除引起柱效下降和柱压升高的因素。可通过以下几点完成色谱柱的日常维护工作。

1.流动相的pH由于硅胶基质的填料中存在Si——C和Si——O键，流动相超过其pH范围将会导致硅胶基质溶解和键合相碳链断裂，使柱效下降，寿命变短。由于流动相的pH控制不当而对色谱柱造成的损害，通常很难使色谱柱恢复。因此，必须认真对待，严格控制流动相的pH。

2.去除样品和流动相中的固体颗粒样品和流动相中含有的固体颗粒物质，会堵塞色谱柱筛板，筛板被堵不仅会引起柱压升高，而且还会引起柱效下降，因为筛板的堵塞会引起液流不均，导致色谱峰形拖尾、变宽，甚至出现双峰，从而使柱效下降。因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析前对样品进行超声、针筒过滤，流动相过0.45um滤膜，尤其是流动相中加入了缓冲盐(如NaH₂PO₄等)，必须过滤。

3.使用保护柱或在线过滤器样品和流动相经过滤后，并不能完全消除固体颗粒物质，因为泵的磨损、密封圈和管路的老化，也会产生固体颗粒物，这些固体颗粒被流动相带入色谱柱，堵塞筛板，导致柱压升高、柱效下降。保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱筛板径相同，因此，可以阻止固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。由于柱压升高在分析故障中占很大的比例，因此，除了对样品和流动相进行过滤外，建议在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。

4.正确使用缓冲盐缓冲液可以提供离子平衡的反离子，并使流动相保持一定的离子强度和pH，减少拖尾。缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，因此，缓冲盐使用不当会致其析出，堵塞填料基质上的空隙，使填料板结，柱压上升；同时，阻碍了基质上键合的碳链自由舒展，使色谱柱的保留能力下降，柱效降低。

缓冲盐析出后，去除非常困难，因此，正确使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出，其方法可归结为一句话：使用前要过滤，使用后要冲洗。具体方法如下：

(1)等度条件。使用缓冲盐前，用过滤后的流动相以1.0ml/min流速冲洗20～30倍柱体积，然后再使用含有缓冲盐的流动相；使用后去除缓冲盐的方法，是用过渡流动相以1.0mL/min流速，冲洗30倍柱体积，然后以纯有机溶液，冲洗30倍柱体积保存。

(2)梯度条件。用含有缓冲盐的流动相进行梯度洗脱之前，用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0mL/min流速，冲洗30倍柱体积，再开始梯度的运行；分析完成后，再用过渡流动相以1.0mL/min流速，冲洗色谱柱30倍柱体积，最后，以纯有机溶液冲洗30倍柱体积保存。

(3)在使用缓冲液的过程中还要注意以下几点。①避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用；②缓冲液最好要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会发生很多怪现象；③使用缓冲液要及时掌握pH范围，做到胸中有数；④清洗液路和柱子时，有温控可加热到30℃易于冲洗；⑤长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，定期用10%硝酸冲洗液路(拆下柱子，冲洗30mL10%硝酸溶液，再用5倍水冲洗)。

5.防止强保留物质在色谱柱中存留强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，对样品中的化合物产生额外的保留行为，不仅引起峰形变宽、拖尾，还使柱子寿命变短。样品溶液走完要立即用强溶剂冲柱子。

文章来源：《无机化学核心教程（第二版）》

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