高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC)，又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱，系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的物质，由流动相带入色谱柱内，组分在柱内分离，并进入检测器检测，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。

高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9×10⁷Pa)，色谱柱是以特殊的方法用小粒径填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万)，同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相色谱法按分离机制的不同分为液-固吸附色谱法、液-液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法等。

高效液相色谱法是目前在中药成分分析检测中应用最普遍的方法，包括鉴别、限度检查、含量测定、指纹图谱分析等。高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器被检测，根据对照品与供试品中相应色谱峰的保留时间定性，以峰面积或峰高值计算测定含量的方法。

一、主要类型

高效液相色谱法的主要类型与经典液相色谱法相似。按固定相的聚集状态可分为液液色谱法和液固色谱法两大类。按分离原理可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、分子排阻色谱法等。按流动相和固定相的相对极性可分为正相色谱和反相色谱。流动相的极性小于固定相的洗脱方式，称为正相洗脱。若固定相是非极性的，流动相用甲醇、水等极性溶剂，则称为反相洗脱。目前，高效液相色谱70%以上采用反相洗脱方式。

二、基本原理

1.吸附色谱法又称液固色谱法。以固定吸附剂为固定相，吸附剂表面的活性中心具有吸附能力。被分离的组分分子(溶质分子)被流动相带入柱内与流动相中的溶剂分子争夺吸附剂表面的活性中心，靠溶质分子吸附系数的差别而分离。

2. 分配色谱法又称液液色谱法。根据样品组分在两种互不相溶(或部分相溶)的液体中溶解度的不同，有不同的分配，从而实现分离。

3. 离子交换色谱法利用被分离组分离子交换能力的差别，或选择系数的差别而实现分离。

4. 分子排阻色谱法根据被分离组分分子的线团尺寸或渗透系数的大小而进行分离。

文章来源：《食品安全国家标准汇编食品添加剂(五)》

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