1 范围

本标准规定了可乐型饮料，咖啡、茶叶及其固体和液体饮料制品中咖啡因含量的测定方法—高效液相色谱法。

本标准适用于可乐型饮料，咖啡、茶叶及其固体和液体饮料制品中咖啡因含量的测定。

2 原理

可乐型饮料脱气后，用水提取、氧化镁净化；不含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品用水提取、氧化镁净化；含乳的咖啡及茶叶液体饮料制品经三氯乙酸溶液沉降蛋白；咖啡、茶叶及其固体饮料制品用水提取、氧化镁净化；然后经C₁₈色谱柱分离，用紫外检测器检测，外标法定量。

3 试剂和材料

注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。

3.1 试剂

3.1.1 氧化镁(MgO)。

3.1.2 三氯乙酸(CCI₃COOH)。

3.1.3 甲醇(CH₃OH):色谱纯。

3.2 试剂配制

三氯乙酸溶液(10g/L)：称取1g三氯乙酸(3.1.2)于100mL容量瓶中，用水定容至刻度。

3.3 标准品

咖啡因标准品(C₈H₁₀N₄O₂)：纯度≥99%。

3.4 标准溶液配制

3.4.1 咖啡因标准储备液(2.0mg/mL):准确称取咖啡因标准品20mg(精确至0.1mg)于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容。放置于4℃冰箱，有效期为六个月。

3.4.2 咖啡因标准中间液(200ug/mL):准确吸取5.0mL咖啡因标准储备液(3.4.1)于50mL容量瓶中，用水定容。放置于4℃冰箱，有效期为一个月。

3.4.3 咖啡因标准曲线工作液：分别吸取咖啡因标准中间液(3.4.2)0.5mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL至10mL容量瓶中，用水定容。该标准系列浓度分别为10.0ug/mL、20.0ug/mL、40.0ug/mL、100ug/mL、200ug/mL。临用时配制。

4 仪器和设备

4.1 高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器。

4.2 天平：感量为0.1mg。

4.3 水浴锅。

4.4 超声波清洗器。

4.5 0.45um微孔水相滤膜。

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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