4 仪器和设备

4.1 分析天平：感量0.1mg。

4.2 pH计：精度0.01。

4.3 离心机：转速≥1500r/min。

4.4 恒温水浴锅：温度可控制在40℃±2℃。

4.5 分光光度计。

5 分析步驟

5.1 试样处理

准确称取5g(精确0.0001g)混合均匀的试样于烧杯中，用30mL40℃温水溶解，转入100mL容量瓶中。加入10mL13%高氯酸溶液，混合均匀后静止20min。用蒸馏水定容至刻度，混匀，用定量滤纸过滤。

取滤液20mL，用4mol/L氢氧化钾溶液调pH为12.5～13.0后，置于40℃水浴60min。冷却后用13%高氯酸调pH为7.0～7.5。将样液转入50mL容量瓶中，用蒸馏水定容。混匀后置于4℃冰箱中过夜。将试样处理液从冰箱中取出放置至室温，取上清液用0.45um滤膜过滤后备用。

5.2 标准曲线的绘制

吸取左旋肉碱标准工作液2.0mL于1cm比色皿中，加入0.8mL显色工作液和100uL乙酰辅酶A溶液，盖上比色皿盖，混合均匀后放入分光光度计中，分光光度计的波长调为412nm,5min后归零。迅速加入100uL乙酰肉碱转移酶溶液，混合均匀后放入分光光度计中，反应10min后记录吸光值。以左旋肉碱标准工作液的浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标，制作标准曲线。

5.3 试样测定

取2.0mL试样处理液按5.2的步骤测定其吸光值。在标准曲线上查得试样待测液的浓度。

6 分析结果的表述

试样中的左旋肉碱的含量X,以质量分数mg/100g表示，按式(1)计算:

式中：

X—样品中左旋肉碱含量，单位为毫克每百克(mg/100g);

c—从标准曲线上查得的试样处理液浓度，单位为微克每毫升(ug/mL)；

V—滤液的体积，单位为毫升(mL)；

m—试样的质量，单位为克(g)。

计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留小数点后一位。

7 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。

8 其他

方法检出限0.6mg/100g,定量限为2mg/100g。

相关链接：婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定（一）

文章来源：《食品安全国家标准汇编检验方法（一）》

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