一、测定原理

不同样品经提取后，将提取液过滤，经反相高效液相色谱分离测定，根据保留时间定性，外标峰面积定量。

标准的检出限：对于固态食品，糖精钠的检出限为3.0mg／kg。

二、实训操作

1．仪器设备

高效液相色谱仪：配有紫外检测器；离心机：转速不低于4000r／min；pH计；天平：

分度值为0.01g和0.1mg；洁净小烧杯；玻棒；pH试纸。

2．试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水符合GB／T6682要求。

(1)甲醇。

(2)氨水(1+1)氨水加等体积的水混合。

(3)乙酸铵溶液称取1.54乙酸铵，加水溶解并稀释至1000mL。

(4)糖精钠标准储备液准确称取0.1702g糖精钠(C6H4CNNaSO2)(120℃烘干4h)，加水溶解并定容至200mL。此溶液中糖精钠的含量为1.00mg／mL。

(5)标准使用液准确吸取不同体积的糖精钠标准储备溶液，将其稀释成糖精钠含量为0.000、0.020、0.040、0.080、0.160、0.320mg／mL的混合标准使用液。

(6)微孔滤膜0.45μm，水相。

3．样品预处理

用一洁净小烧杯精确称取配制酒样品(m)10.0g(精确至0.001g)一微热搅拌除去二氧化碳和乙醇一用水定容至原体积一于25mL容量瓶一氨水(1+1)调PH≈7一加水定容至刻度一混匀—加。45μm滤膜过滤一滤液待上机分析。

4．成分分析

(1)色谱条件

①色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm，性能相当者；

②检测器：紫外检测器，230nm波长

③流动相：甲醇+0.02mol／L乙酸铵溶液(5+95)；

④流速：1mL／min；

⑤检测波长：230nm；

⑥进样量：10μm。

(2)测定取处理液和混合标准使用液各10μL注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据定性，以其峰面积求出样液中被测物质含量，供计算。