紫外一可见分光光度法在药学领域中主要是用于对有机化合物的分析。多数有机药物由于分子中含有某些能吸收紫外一可见光的基团(大多是有共轭的不饱和基团)，而能显示吸收光谱。不同的化合物可有不同的吸收光谱。利用吸收光谱的特点可以进行药品与制剂的定量分析，纯物质的鉴别及杂质的检测，与红外吸收光谱、质谱、核磁共振谱一起，用以解析物质的分子结构。

溶剂和溶液的酸碱性等条件以及所用单色光的纯度都对吸收光谱的形状与数据有影响，所以，应使用选定的溶液条件和有足够纯度单色光的仪器进行测试。

一、定性鉴别

1．与标准品，标准图谱对照

将样品和标准品用相同溶剂配制成几乎相同浓度，在同一条件下分别测定吸收光谱，比较光谱图是否一致。若二者是同一个物质，则二者的光谱图应完全一致。如果没有标准品，也可以与标准光谱图(如Sadtler标准图谱)对照比较。但这种方法要求仪器准确度、精密度高，而且测定条件要相同。

采用紫外光谱进行定性鉴别，有一定的局限性。主要是因为紫外吸收光谱吸收带不多，曲线形状变化不大，在成千上万种有机化合物中，不相同的化合物可以有很相似甚至雷同的吸收光谱。所以在得到相同的吸收光谱时，应考虑到有并非同一物质的可能性。为了进一步确证，有时可换一种溶剂或采用不同酸碱性的溶剂，再分别将标准品和样品配成溶液，测定光谱图以作比较。

若两种纯化合物的紫外光谱有明显差别时，即可以判断不是同一种物质。

2．对比吸收光谱特征数据

最常用于鉴别的光谱特征数据有吸收峰的波长λmax和峰值吸光系数，ελmax。具有不只一个吸收峰的化合物，也可同时用几个峰值作为鉴别依据。一些药物或一类药物在一定溶剂中的最大紫外吸收峰的波长(λmax)位置是固定的，其吸收系数亦是一个常数。例如，呋喃唑酮在367nm处有吸收峰，其吸收系数E应为746。但由于吸收光谱谱带较宽，有的λmax相同，E值亦相近，如维生素D2与维生素D3，故仍须结合其他理化性质，有时也可利用光谱中的最小吸收(吸收谷)的光谱特征来鉴别。肩峰或吸收谷处的吸光度测定受变动的影响也较小，有时也用谷值或肩峰值与峰值同时用作鉴别数据。

具有不同吸光基团的化合物，可有相同的最大吸收波长，但它们的摩尔吸收系数常有明显的差异，所以摩尔吸收系数常用于分子结构分析中吸光基团的鉴别。对于分子中含有相同吸光基团的同系物，它们的摩尔吸收系数常很接近，但由于分子量不同，使百分吸收系数的值差别较大。例如黄体酮、睾丸素等及其衍生物，在240nm处都有吸收峰，摩尔吸收系数大多在(1.5一l.7)×10。范围内，差别不大；而百分吸收系数的差别可以有从350～600之间的变化，因而有较大的鉴别意义。

3．对比吸光度的比值

有些药物的吸收峰较多，如维生素B12有三个吸收峰(278、361、550nm)，就可采用在三个吸收峰处测定吸光度，求出这些吸光度的比值，规定吸光度比值在某一范围，作为鉴别药物的依据之一。如维生素B2在三个吸收峰处吸光度比值规定为：A361/A278应为1．70—1．88；j应为3．15～3.45。

中国药典收载的许多品种，采用紫外一可见分光光度法鉴别的方法是将一定溶剂中的样品化合物的吸收光谱与相同溶剂中的标准化合物的吸收光谱特征进行对照比较，包括吸收光谱形状，吸收峰数目，各吸收峰的峰和谷波长位置、强度和相应的吸收系数等。例如乙胺嘧啶的鉴别即规定将乙胺嘧啶用0．1mol／L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每lml中约含13“g的溶液测定，应在272nm波长处有最大吸收，在261nm波长处有最小吸收；并且在272nm波长处的吸收系数(E：：)为309～329。而丙酸倍氯米松的鉴别则规定将丙酸倍氯米松用乙醇溶解并定量稀释制成每lnff中含201~g的溶液测定，应在239nm波长处有最大吸收，吸收度为0．57～0．60；在239nm与263nm波长处的吸收度比值应为2．25～2．45。

二、纯度检查

纯化合物的吸收光谱与所含杂质的吸收光谱有差别时，可用紫外分光光度法检查杂质。杂质检测的灵敏度取决于化合物与杂质两者之间吸收系数的差异程度。

1．杂质检查

如果某一化合物在紫外一可见光区没有明显的吸收峰，而所含杂质有较强的吸收峰，那么含有少量杂质就能被检查出来。例如乙醇中可能含有杂质苯，苯的A～为256nm，而乙醇在此波长处几乎无吸收，乙醇中含苯量低达lOppm，也能从光谱曲线中查出。

2．杂质的限度检测

药物中的杂质，常需制定一个容许其存在的限度。例如，肾上腺素在合成过程中有一中间体肾上腺酮，当它还原成肾上腺素时，反应不够完全而带入产品中，成为肾二腺素的杂质，将影响肾上腺素的疗效。因此，肾上腺酮的量必须规定在某一限度之下。在0.01／L盐酸溶液中肾上腺酮与肾上腺素的紫外吸收曲线有显著不同、在310nm处，肾上腺酮有最大吸收，而肾上腺素则几乎没有吸收。因此，测定肾卜腺素005moL／L盐酸溶液在310hm波长处的吸光度，可用以检测肾上腺素酮的混入量。方法是将肾上腺素制成品，用0．05mol／L盐酸液，制成每lml含2mg的溶液，在1cn吸收池中，于310nto波长处，测定吸光度A。若规定A值不得超过0．05，则以肾上腺酮的EI值(435)计算，即相当于禽酮体不超过0．06％。