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克雷伯菌属(klebsiella )是条件致病菌,临床感染常见的是肺炎克雷伯菌,是医院感染的重要病原菌。
一、分类
克雷伯菌属主要包括:肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)、产酸(催娩)克氏菌(K.axytoca)等7个种。其中肺炎克雷伯菌又分3个亚种:肺炎亚种(subsp.pneumoniae),臭鼻亚种(subsp.ozaenae)和鼻硬结亚种(subsp.rhinoscleromatis)。
二、生物学特性
1.形态与染色为革兰阴性短杆菌,无鞭毛,无芽胞,患者标本或营养丰富培养基上的培养物直接涂片染色可见明显的荚膜。
2.培养特性兼性厌氧,营养要求不高。初次分离在普通琼脂平板上可形成较大、突起、灰白色、黏液(M)型的菌落。菌落大而厚实,而且相邻菌落易发生融合,用接种环挑起呈长丝状,此特征有助于鉴别。在血平板上形成不溶血的M型大菌落,在肠道选择鉴别培养基上形成乳糖发酵型菌落:在液体培养基呈混浊生长,可见菌膜和黏性沉淀物。
3.生化反应本菌重要的生化反应为脲酶、ONPG、丙二酸盐、黏质酸盐阳性,IMVic试验的结果为-、-、+、+。
三、临床意义
肺炎克雷伯菌肺炎亚种俗称肺炎杆菌,存在干人类呼吸道、肠道以及水和谷物中。当机体免疫力降低或长期大量使用抗生素导致菌群失调时引起感染。常见有肺炎、支气管炎、泌尿道和创伤感染,严重者也可引起败血症、脑膜炎、腹膜炎等。
肺炎克雷伯菌臭鼻亚种俗称臭鼻杆菌。侵犯鼻咽部,引起慢性萎缩性鼻炎,重者可使局部组织坏死。
四、微生物学检验
1.标本采集依不同疾病采集不同标本,如痰、脓汁、脑脊液、血液等。
2,直接检查取痰、脓汁、尿液、脑脊液、胸腔积液和腹腔积液等直接涂片或离心取沉淀物涂片、革兰染色镜检,可见革兰阴性球杆菌,有明显的荚膜。
3.分离培养将标本接种于血琼脂和MAC等肠道选择鉴别培养基,血液标本增菌后再做分离培养。经37 ℃ 18~24 h孵育,取发酵乳糖的M型菌落或血平板上灰白色大而黏稠的菌落涂片、染色镜检,然后移种于KIA,MIU,IMVIC试验培养基及其他生化反应培养基。
4.鉴定本菌属氧化酶,DNA酶、鸟氨酸、吲哚及动力均阴性,分解葡萄糖产酸产气,脲酶、枸橼酸盐、丙二酸盐阳性。克雷伯菌属与肠杆菌科中引起医院感染的常见条件致病菌鉴别见表16-13。本菌属各菌种间鉴别见表16-14。
表16-13克雷伯菌属与肠杆菌科其他条件致病菌鉴别
注:(+)表示76%~89%菌株PF性;(一)表示76%~89%菌株阴性。
表16-14克雷伯菌属各菌种间鉴别
注:+表示90%以上阳性;一表示90%以上阴性;V表示不定。
本菌属与类似菌属的鉴别可用特异性诊断血清作荚膜肿胀试验,方法是将该菌接种于促进荚膜生长的华-佛(Worfel-Ferguson)液体培养基,经37 ℃ 18~24 h孵育后,取1滴培养物加于载玻片上,向其上加墨汁或美蓝染液1滴,再加1滴接种环特异性抗血清,混合后加盖玻片,于油镜下观察。同时用不加抗血清作空白对照。加抗血清者菌体周围空白圈明显大于空白对照者为阳性。
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