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耶尔森菌属分类和生物学特性

发布时间:2017-08-30 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1812

耶尔森菌属(Yersinia)通常先引起啮齿类、小动物和鸟类感染,然后通过接触动物、被吸血节肢动物叮咬或食用污染食物等途径而感染人类。

一、分类

耶尔森菌属包括11个种,至少有3种肯定是人类致病菌,即鼠疫耶尔森菌(Y.pestis),小肠结肠炎耶尔森菌(Y.enterocolitica)和假结核耶尔森菌(Y.pseudotuberculosis)。

二、鼠疫耶尔森菌

鼠疫耶尔森菌俗称鼠疫杆菌,是鼠疫的病原菌。鼠疫是一种自然疫源性的烈性传染病,我国将其列为甲类传染病之首(一号病),人类鼠疫是被疫鼠的鼠蚤叮咬而受染。

(一)生物学特性

1.形态与染色为革兰阴性球杆菌,大小为(0.5~0.8)um×(1~2)um。常为单个散在,偶尔成双或呈短链,两端浓染。有荚膜,无鞭毛,无芽胞。由尸体或动物新鲜内脏制备的印片或涂片其形态典型,吞噬细胞内外均可见本菌。在化脓或溃疡性病灶及腐败材料标本中,菌体膨大成球形,且着色不佳。在陈旧培养物或高盐(30g/L NaCl)培养基上菌体呈多形性,如球形、杆形、棒形或哑铃状等,亦可见到着色极浅的细菌轮廓,称为菌影。

2.培养特性兼性厌氧,营养要求不高,最适生长温度为27~30℃,最适pH 6.9~7.2。在普通培养基上能生长,但生长缓慢。在含血液或组织液的培养基.上,24~48 h可形成柔软、黏稠的R型菌落。在液体培养基中开始为混浊生长,24 h后转为沉淀生长,48 h后可形成菌膜,稍加振动菌膜,呈钟乳石状下垂,此特征有一定鉴别意义。

3.生化反应分解葡萄糖甘露醇产酸不产气,对多数糖不分解。大部分菌株还原硝酸盐。IMVic为-、+、-、-,赖氨酸及鸟氨酸脱羧酶、苯丙氨酸脱氨酶脲酶硫化氢均阴性。半固体培养基穿刺接种后,表面可形成菌膜,穿刺线周围有纵树根状生长现象。

4.抗原构造本菌抗原构造复杂,至少有18种抗原,其中比较重要的抗原有F1,V/W,T三种。

(1) F1抗原:又称荚膜抗原,为蛋白质多糖复合物,不耐热,100℃ 15 min失去抗原性;其抗原性强,特异性高,刺激机体产生的抗体有免疫保护作用,因其易引起超敏反应,故不用于人工主动免疫,只作为血清学试验的诊断抗原。

(2) V/W抗原:为表面抗原,具有抗吞噬作用,与本菌毒力有关。

(3) T抗原:为蛋白质杭原,即外毒素,对鼠类有剧烈毒性,对其他动物毒性低,故称鼠毒素。具有良好的抗原性和免疫原性,可用0.2%甲醛脱毒成类毒素,免疫马可制成抗毒素。

5.抵抗力对理化因素抵抗力较弱。湿热70~80℃ 10 min或100℃ 1 min死亡,5%来苏儿或5%石炭酸20 min,可杀死痰液中病菌,但该菌在痰液中能存活36天,在蚤粪和土壤中能存活1年左右。

6.变异性 鼠疫耶尔森菌的生化特性、毒力、耐药性和抗原构造等均可出现变异。野生菌株的菌落呈R型,经人工培养后菌落逐渐变为S型,其毒力也随之减弱。

(二)临床意义

1.致病物质 鼠毒素具有外毒素性质,主要对鼠类致病,但只有当细菌自溶裂解后才能释放。鼠疫耶尔森菌的毒力很强,少数几个细菌即可使人致病,其致病性主要与Fl抗原、V/W抗原、外膜抗原及内毒素等相关。

2.所致疾病鼠疫是自然疫源性传染病,一般先在鼠类间流行,然后通过鼠蚤叮咬传给人类。人患鼠疫后可通过人蚤或呼吸道等途径在人群间传播。临床类型有腺型、肺型和败血症型鼠疫。

(1)腺鼠疫:鼠疫耶尔森菌侵入人体,被吞噬细胞吞噬后在细胞内繁殖,并沿淋巴循环到达局部淋巴结,引起严重的淋巴结炎。淋巴结肿胀、坏死和脓肿。常累及的淋巴结多位于腹股沟,一般为单侧。

(2)肺鼠疫:吸入染菌的空气引起原发性肺鼠疫,也可由腺鼠疫或败血型鼠疫继发引起,患者出现寒战高热、咳嗽、胸痛、咯血,患者多因呼吸困难或多器官功能衰竭而死亡,死亡多发生于感染后2~4天内。死者皮肤呈黑紫色,故称“黑死病”。

(3)败血型鼠疫:腺鼠疫或肺鼠疫患者的病原菌侵入血流,导致败血型鼠疫,此型最严重,患者体温可达39~40℃,发生休克和DIC,皮肤黏膜出现淤点或淤斑,全身中毒症状及中枢神经系统症状明显,多迅速恶化而死亡。

(三)微生物学检验

鼠疫耶尔森菌传染性极强,是甲类传染病的病原体,应严格遵守操作规程和生物安全规范,采取必要的防护措施。

1.标本采集临床标本包括血液、痰、淋巴结穿刺液。非临床标本包括:①尸体标本,包括淋巴结、肝、脾、肺组织、心血,腐败尸体取骨髓;②鼠标本,应严格消毒鼠体表,无菌取尸体标本。

2.直接检查标本涂片、革兰染色镜检,可见革兰阴性、卵圆形粗短杆菌,两端浓染,在慢性病灶或陈旧培养物中可呈多形态,动物标本可见荚膜。

3.分离培养无污染标本接种于血琼脂平板,污染标本可用选择性培养基(龙胆紫溶血亚硫酸钠琼脂等),接种两块平板分别置于28℃和37℃孵育24~48 h,取可疑菌落鉴定。在液体培养基中培养48 h后如形成“钟乳石”现象,则具有一定的鉴别意义。

4.鉴定根据菌体形态、菌落特点、液体培养基中的生长现象及生化反应特征,结合临床表现和流行病学资料综合进行分析。

5.动物试验有助于确定鼠疫耶尔森菌的毒力并能筛除杂菌,多采用皮下注射方法。动物一般3~7天后死亡,如7天后不死应处死后取肝、脾等标本进行检查。

需注意的是,一旦疑为本菌,应立即向当地的疾病控制中心(CDC)报告,并将菌种送专业实验室进一步鉴定。

三、小肠结肠炎耶尔森菌

小肠结肠炎耶尔森菌是引起人类小肠结肠炎的病原菌。

(一)生物学性状

该菌为革兰阴性球杆菌,偶见两端浓染。25℃培养有周身鞭毛,37℃培养很少或无鞭毛。无荚膜,无芽胞。
兼性厌氧,营养要求不高,最适pH7.6。耐低温,4℃能生长,最适温度为20~28℃。在血琼脂平板上某些菌株可出现溶血环,在肠道菌选择培养基上形成不发酵乳糖的半透明、扁平小菌落。分解葡萄糖和蔗糖产酸,脲酶阳性,VP试验25℃阳性,37℃阴性,鸟氨酸脱羧酶阳性。

根据菌体0抗原不同可将该菌分为50多个血清型,其中仅有几种血清型与致病有关,致病型别在各地区有所不同,我国主要为0:9,0:8,0:5和0:3等。

(二)临床意义

1.致病物质V/W抗原具有抗吞噬作用。0:3,0:8,0:9等菌株产生与大肠埃希菌肠毒素ST相似的肠毒素。另外,某些菌株的O抗原与人体组织有共同抗原,可引起自身免疫性疾病。

2.所致疾病本菌天然寄生在鼠、兔、猪等动物体内,为人畜共患病原菌,人通过污染食物(牛奶、肉类等)、水经口感染或因接触染疫动物而感染。潜伏期3~7天,临床表现以小肠结肠炎多见,也可引起败血症。常见症状为发热、腹泻(黏液、水样便或血样便),与菌痢相似。根据病变位置与发病机制不同,将小肠结肠炎分为四型:①胃肠炎(或小肠结肠炎)型;②回肠末端炎、阑尾炎和肠系膜淋巴结炎型;③结节性红斑与关节炎型(自身免疫病);④败血症型。

(三)微生物学检验

1。标本采集粪便及可疑食物,也可取血液、尿液。

2.分离培养粪便标本可直接接种于MAC、新耶尔森菌选择性琼脂(NYE)或SS琼脂,亦可接种于5 ml. pH7.4的改良磷酸盐缓冲液中,置于4℃冷增菌,于7,14,21天取冷增菌培养物接种上述培养基,25℃孵育24~48 h,取乳糖不发酵型菌落继续鉴定。

3.鉴定依据菌落特征、菌体形态和染色性、动力以及VP试验、22~25℃阳性、35~37℃阴性,嗜冷性,脲酶阳性,硫化氢阴性,鸟氨酸脱羧酶阳性,分解葡萄糖、蔗糖产酸不产气等生化特征,再结合血清学进行鉴定。

四、假结核耶尔森菌

假结核耶尔森菌存在于多种动物肠道中,为人畜共患病原菌,主要通过食用该菌污染的食物而引起人类感染。由于该菌在动物感染的脏器中形成粟粒状结核结节,人感染部位形成结核样肉芽肿,故称假结核耶尔森菌。
本菌为革兰阴性,具多形态性,呈球状或短杆状,在病变组织中菌体两端浓染。无荚膜、无芽胞。需氧或兼性厌氧,最适生长温度为25℃(动力阳性),35℃培养动力消失。在血琼脂平板上孵育24 h可形成小菌落,在EMB或MAC平板上为无色小菌落。生化反应与鼠疫耶尔森菌相似,引起的疾病与小肠结肠炎耶尔森菌相似,但发病率很低。引起人类感染的主要是O1血清型。假洁核耶尔森菌基本生化反应特征为氧化酶阴性,动力22℃~25℃阳性、3.7℃阴性,分解葡萄糖产酸不产气,乳糖阴性,枸橼酸阴性,苯丙氨酸脱氨酶阴性,VP阴性,吲哚阴性,脲酶阳性。

五、其他耶尔森菌

其他耶尔森菌包括弗氏耶尔森菌(Y.frederiksenii)、中间耶尔森菌(Y.intermedia),克氏耶尔森菌(Y.kristensenii)、奥氏耶尔森菌(Y.aldouae)、伯氏耶尔森菌(Y.hercovieri),莫氏耶尔森菌(Y.mollaretti)、罗氏耶尔森菌(Y.rohdei )和鲁氏耶尔森菌(Y.ruckeri)。均能在4℃环境中生长,可存在于冷藏食品中,具有潜在的致病性。

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