厌氧菌分布广泛，引起的感染遍及临床各科，多为混合感染。厌氧菌采用常规细菌培养方法不能检出，且采用经验性治疗往往有较好的疗效，使得临床实验室一般不进行厌氧菌AST。2012版CLSI M11-A7文件指出进行厌氧菌AST的目的在于：①协助重症厌氧菌感染患者的治疗；②定期监测特定区域的厌氧菌耐药谱变化，以指导经验性选择抗菌药物；③确定新药的厌氧菌敏感谱。针对临床厌氧菌株进行AST的主要指征是帮助选择有效药物，在以下情况时尤为重要：①已知感染的厌氧菌种属对于常用药物耐药；②已确诊的厌氧菌感染，经验用药后疗效不佳；③分离出的厌氧菌毒力较强，或对于感染的厌氧菌缺乏经验性治疗方案；④严重的厌氧菌．感染，如脑脓肿、心内膜炎、假肢感染、败血症等，或为需要长期治疗的患者制定合理治疗方案；⑤在正常无菌部位分离到厌氧菌，并且能够排除正常厌氧菌群污染。此外，当同时分离出几种病原厌氧菌，至少要对脆弱拟杆菌群（通常耐药率最高）进行AST。

一、厌氧培养基

琼脂稀释法采用强化布氏琼脂培养基，其中添加了5 ug/mL,的氯化血红素、1 ug/mL的维生素K1以及5％（体积分数）脱纤维羊血。若用于常规试验，密封于2～8℃保存，不超过7天；若用于科研和评估，则不能超过72 h；若含有亚胺培南、克拉维酸的β-内酰胺／β-内酰胺酶抑制剂复合药物，或其他已知的任何不稳定药物的平板，均应试验当日配制。详细方法见2012版CLSI M11-A7文件。微量肉汤稀释法采用强化布氏肉汤培养基，即布氏肉汤中添加5 ug/mL、的氯化血红素、1 ug/mL的维生素K1以及5％溶解的马血。

二、常用抗厌氧菌药物

抗厌氧菌药物的选择不多，根据微生物学和药理学因素以及临床适应证和疗效，CLSI制定了推荐常规报告的抗厌氧菌药物表，见表10-3。

表10-3CLST厌氧菌药敏试验的抗菌药物建议分组

三、厌氧菌药敏试验常用方法

厌氧菌AST的常用方法有琼脂稀释法、肉汤稀释法、E-试验和牙内酰胺酶检测试验，其基本原理、方法与需氧菌相同，但是在培养基、操作环境和培养条件方面有所区别。2012版CLSI推荐的方法有琼脂稀释法和微量肉汤稀释法。琼脂稀释法是适用于所有厌氧菌的参考方法，接种菌量为每点1×10⁵ CFU；目前微量稀释法仅适用于脆弱拟杆菌群的某些药物AST，接种菌量为1×10⁶ CFU/mL。厌氧菌的培养设备为厌氧箱或厌氧罐，提供厌氧的气体环境80％N₂,10％H₂和10％CO₂，在35～37℃培养48 h。

利用产色头抱菌素法进行β-内酰胺酶检测可以预测细菌对青霉素的敏感性，但是不能预测对头抱菌素的敏感性。如果临床医生考虑用青霉素或氨苄西林治疗，则应进行β-内酰胺酶检测。绝大多数脆弱拟杆菌群产β-内酰胺酶，故认为它们对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药，不必做AST。而某些不产β-内酰胺酶的厌氧菌可因为其他机制对β-内酰胺类药物耐药，因此，即使β-内酰胺酶检测阴性也不能推断该菌对此类药物敏感。

许多厌氧菌感染为混合感染，耐药率最高的细菌应首先进行试验和报告（通常是脆弱拟杆菌群）。

四、质控菌株

CLSI推荐的质控菌株有脆弱拟杆菌ATCC25285、多形类杆菌ATCC29741、迟缓优杆菌ATCC43055和难辨梭菌ATCC700057。