一、实验目的

    掌握气相色谱法测定西红柿中甲萘威残留的原理和方法。    

    二、实验原理    

    甲萘威，学名1一萘基一N一甲基氨基甲酸酯，又名西维因，是第一个人工合成的氨基甲酸酯杀虫剂。

    样品中甲萘威残留经有机溶剂提取，液液分配、微型柱净化除去干扰物质后，上样于气相色谱仪，以氮磷检测器检测。与标准品比较，根据色谱峰的保留时间进行定性，以外标法进行

定量。

    三、仪器与试材

    1．仪器

    气相色谱仪(附氮磷检测器)、组织捣碎机、离心机、超声波清洗器、旋转蒸发仪。

    2．试剂

    除特别注明外，实验中所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。

    (1)常规试剂：丙酮、CH₂Cl₂、乙酸乙酯、甲醇、正己烷、H₃PO₄、NaCl、无水Na₂SO₄(120℃干燥4h)、NH₄Cl、硅胶(60～80目，130℃烘2h，以5％水失活)、助滤剂celite 545。

    (2)常规溶液：正己烷一CH₂Cl₂混合液(9+1，体积比)、正己烷一丙酮混合液(7+3，体积

比)、丙酮一乙酸乙酯混合液(1+1，体积比)、丙酮一甲醇混合液(1+1，体积比)。

    (3)凝结液：称取5g NH₄Cl，加10mL H₃PO₄和100mL水溶解，用前稀释5倍。

    (4)甲萘威标准溶液：准确称取甲萘威标准品，以丙酮为溶剂，配制成1mg／mL标准储备

液，储于冰箱中。使用时再根据农药在气相色谱仪上的响应情况，吸取不同量的标准储备液，用丙酮稀释配制成标准使用液。

    3．实验材料

    2～3种西红柿，各200g。

    四、实验步骤

    1．样品提取    

    (1)取100g样品以组织捣碎机捣碎后，测定样品中的水分含量。

    (2)称取5．00g捣碎样品，根据样品含水量补加与样品含水量之和为5．00g的水和10mL

丙酮。    

    (3)将离心管置于超声波清洗器中，超声提取10min。

    (4)以5000r／min离心10min，吸上清液10mL至125mL分液漏斗中。

    2．样品净化

    (1)向分液漏斗中分别加入40mL凝结液和1g助滤剂celite 545，轻摇后放置5min。

    (2)将分液漏斗中的溶液经附两层滤纸的布氏漏斗抽滤，并用少量凝结液洗涤分液漏斗和布氏漏斗。

    (3)将滤液转移至另一125mL的分液漏斗中，加入3g NaCl溶解后，依次以50mL、50mL、30mL CH₂Cl₂萃取3次，合并CH₂Cl₂萃取液。    

    (4)萃取液经无水Na₂SO₄漏斗过滤至浓缩瓶中，在35℃水浴的旋转蒸发仪上浓缩至少量，

用氮气吹干，取下浓缩瓶，加入少量正己烷溶解残留物。

    (5)以少许棉花塞住5mL医用注射器出口，用lg硅胶以正己烷湿法装柱，敲实，将浓缩瓶

中的浓缩液上柱，并以少量正己烷一CH₂Cl₂混合液洗涤浓缩瓶，一并倒入柱中。    

    (6)依次以4mL正己烷丙酮混合液、4mL乙酸乙酯、8mL丙酮一乙酸乙酯混合液、4mL丙酮一甲醇混合液洗柱。

    (7)收集全部滤液于旋转蒸发仪上，于45℃水浴中浓缩近干，用乙酸乙酯定容至1mL。

    3．测定

    (1)量取1μL标准溶液及样品净化液注入色谱仪中，以保留时问定性，以峰高或峰面积与

标准品比较进行定量。

    (2)色谱参考条件：色谱柱为BP5或O10V-101[25m×0.32mm(内径)]石英弹性毛细管柱；气体流速，氮气(载气)为50mL／min，尾吹气(氮气)为30mL／min，氢气为O.5kgf／cm²，空气

为0.3kgf／cm²；色谱柱升温程序140℃─50℃/min─→185℃(恒温2min)─2℃/min─→195℃

─10℃/min─→235℃(恒温1min)；进样口温度为240℃；检测器为氮磷检测器。

    4．计算

    按下式计算样品中甲萘威的含量：

             hm_s

    x=───────

        h_smf×1000

    式中，x为西红柿样品中甲萘威的含量，mg／kg；h为样品提取液中甲萘威残留的峰高或峰面积；h_s为标准品溶液中甲萘威的峰高或峰面积；m_s为标准品溶液中甲萘威的质量，ng；m为样品的质量，g；f为换算系数，西红柿为2／3。

    五、注意事项

    1．样品的用量可以根据样品农药残留的含量来确定，可以大于5.00g，也可以少于5.00g。

    2．旋转蒸发时不能将样品完全蒸干，否则将影响分析结果。

    3．色谱柱净化时，应注意各洗涤液之间的连贯性。

    六、思考题

    1．简述气相色谱中氮磷检测器的工作原理。

    2．在旋转蒸发时，如果样液蒸发过度而完全挥发干了，对实验结果将产生什么影响?为什么?