一、实验目的

    掌握气相色谱法测定黄瓜中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留的原理和方法。

    二、实验原理

    样品中甲胺磷和乙酰甲胺磷农药残留经提取、净化后，再经气相色谱分离，于富氢火焰上燃烧，以氢磷氧(HPO)碎片的形式发射波长为526nm的特征光。该特征光通过滤光片选择过滤

后，由光电倍增管接收转换成电信号，经微电流放大器放大后被记录下来。以样品的峰高与标准品的峰高比较，可以进行定量分析，根据保留时间可实现定性分析。

    三、仪器与试材

    1．仪器与器材

    气相色谱仪(带火焰光度检测器)、振荡器、旋转蒸发仪、离心机等。

    2．试剂    

    除特别注明外，实验中所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。

    (1)常规试剂与溶液：丙酮、CH₂Cl₂(重蒸)、无水：Na₂SO₄、HCl溶液(3mol／L)。

    (2)活性炭：用HCl溶液浸泡过夜，抽滤，用水洗至中性，在120℃下烘干备用。

    (3)甲胺磷、乙酰甲胺磷标准溶液(100μg／mL)：分别称取甲胺磷标准品(纯度≥99％)、乙酰甲胺磷标准品(纯度≥99％)各10.0mg于100mL容量瓶中，以丙酮溶解并定容。使用时，根据仪器灵敏度用丙酮稀释配制成单一品种的标准使用液和混合标准工作液，4℃保存。

    3．实验材料

    2～3种黄瓜，各200g。

    四、实验步骤

    1．样品提取

    取10.00g黄瓜，用70g无水Na₂SO₄研磨呈干粉状，倒入具塞锥形瓶中，加入O.4g活性炭

及80mL丙酮，振摇O.5h，以快速滤纸过滤，滤液以旋转蒸发仪浓缩至近干，浓缩液用丙酮定容

至5mL，作为样品提取液。

    2．测定

    (1)将样品提取液与甲胺磷、乙酰甲胺磷单一标准使用液和混合标准工作液分别上样于气相色谱仪，根据农药标准品的出峰时间对样品中农药残留进行定性。以甲胺磷和乙酰甲胺磷浓度已知的标准溶液作外标物，按峰高进行定量。

    (2)参考色谱条件：色谱柱为玻璃柱，内径3mm，长0.5m，内装2％DEGS／Chromosorb WAWDM—CS(80～100目)；气体流速，氮气(载气)为70mL／min，空气为0.7kgf／cm²，氢气为1.2kgf／cm²；进样口温度为200℃；柱温为180℃。

    3．计算

    按下式计算样品中有机磷农药残留量：

         hm_sV₁

    x=──────

         h_sV₂m

    式中，x为样品中甲胺磷或乙酰甲胺磷的含量，mg／kg；m_s为标准品溶液中甲胺磷或乙酰甲胺磷的质量，ng；h为试样的峰高，mm；h_s为标准品溶液中甲胺磷或乙酰甲胺磷组分的峰高，mm；V₁为样品提取液的体积，mL；V₂为注入色谱中试样的体积，mL；m为样品的质量，g。

    五、注意事项

    实验步骤中的色谱条件仅供参考，具体的分析条件应该根据所用气相色谱仪的型号，参考说明书中的条件进行。    

    六、思考题

    1．简述食品样品中常见有机磷农药残留的种类及其提取方法。

    2．根据甲胺磷和乙酰甲胺磷的理化性质，说明样品含水量对提取效果的影响。