正常条件下，血小板以分散的状态运行于血管内，但当血管损伤、血液流变学改变或受到化学物质刺激时，血小板之间则发生变形、黏附、聚集及释放等变化而发生交联，进而促进血栓形成。血小板在血栓形成过程中起着关键性的作用，制备有活性的血小板或洗涤血小板是研究抗血栓药物对血小板功能的影响及作用机制的实验基础。

制备富血小板血浆（platelet rich plasma, PRP )是将血小板与其他血细胞分开但不与血浆分开；制备洗涤血小板是将血小板与血浆蛋白分开。

【材料】

1.抗凝剂3.8%枸橼酸钠；EDTA-Na2(2% EDTA-Nat+0.7% NaCl)。

2．含EGTA 0.2mmo1/L的无Ca²⁺台氏液（NaCI 137mmol/L, KCl 2.68mmol/L, MgS0₄·7H₂0 0.2mmol/L,NaH₂P0₄·2H₂0 0.42mmol/L, NaHC0₃ 11.9mmol/L,葡萄糖5.05mmol/L,pH 6.5）。

3．含0.35％牛血清清蛋白台氏液（NaCl 137mmol/L, KCl 2.68mmol/L, MgS0₄.7H₂0 1.05 mmol/L , NaH₂P0₄·2H₂0 0.42mmol/L，NaHC0₃ 11.9mmol/L，葡萄糖5.05mmol/L, CaC1₂ 1.8mmol/L,pH 7.35）。

4．血细胞计数板、显微镜。

【方法】

1．富含血小板血浆（PRP）的制备取2周内未应用过阿司匹林等抑制血小板功能药物的新鲜血，以枸橼酸钠抗凝，抗凝剂与血的比例为1:9，离心（1000r/min,10分钟），上层即为富含血小板血浆。

2．洗涤血小板的制备取2周内未应用过阿司匹林等抑制血小板功能药物的新鲜血，以EDTA-Na2抗凝，抗凝剂与血的比例为1:9离心（1200r/min, 10分钟），分离上层得PRP，离心（14 000r/min,10分钟）得血小板，以含EGTA无Ca²⁺台氏液洗涤2次，再以含0.35％牛血清清蛋白台氏液悬浮血小板，制成血小板悬液，并将计数调整至2.5x10⁶/ml。

【结果与分析】

1．制备的富血小板血浆已将血小板与其他血细胞分开，但未与血浆分开。操作简便易行。

2．制备的洗涤血小板已进一步将血小板与血浆蛋白分开。用洗涤血小板进行实验，不受血浆蛋白的影响，研究条件比较单纯。

【注意事项】

1．盛装PRP的试管均需硅化并应加盖或用薄膜封口，以免C0₂挥发而改变PRP的pH,pH过酸过碱均会影响血小板功能测定。

2．制备洗涤血小板过程复杂，血小板易被激活而发生自发性聚集，因此，操作时动作应轻柔。

3．血小板在体外活性维持时间短，实验应在取血后5小时内完成。