一、实训目标

1．学习维生素C片剂试液的制备方法；

2．学习计算机控制的波长扫描型紫外可见分光光度计的使用方法

3．掌握标准曲线法，掌握测定维生素C的含量的操作。

二、实训原理

维生素C（抗坏血酸）具有抗氧化作用，存在于许多水果、蔬菜中，它是维生素类药物的主要成分。抗坏血酸是水溶性的，维生素C片剂中的抗坏血酸可用水提取。由于它的还原性很强，在空气中容易被氧化，在碱性介质中更甚，因此提取时应加入少量的酸使溶液呈弱酸性，以降低其氧化速率，减少其损失。

维生素C在紫外区（>200nm）有吸收，其吸光度与溶液中的浓度成正比。据此，可利用标准曲线法定量测定。

三、实训仪器与试剂

1．仪器

T6紫外可见分光光度计；容量瓶；吸量管；烧杯；研钵；过滤装置。

2．试剂

抗坏血酸标准储备液（l0μg/mL);10%HCl溶液；维生素C片剂（市售）。

四、实训步骤

1．配制标准溶液

分别移取抗血酸标准储备液1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于6只100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

2．绘制吸收光谱

用石英比色皿，以水为参比，在200-400nm范围测绘出抗坏血酸的吸收光谱，并确定λmax。此项测试，可用上述标准系列溶液浓度居中的溶液进行。

3．绘制标准曲线

用石英比色皿、以水为参比，在波长λmax分别测定上述5个标准溶液的吸光度。计算机绘出标准曲线，计算回归方程。

4．样品的测定

(1)取5片维生素C药片称重，小心研磨成粉，计算平均片重（g／片）。准确称取相当于0.2片质量的药粉，置于50mL烧杯中，加2mL10％盐酸及少量水溶解。定量转移至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。干过滤，弃出l0mL左右的初滤液，收集续滤液备用。

(2）准确移取5.00mL滤液于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。用石英比色皿、以水为参比，在波长λmax处测定其吸光度，平行测定3次。

(3)将测定的吸光度代入标准曲线回归方程，计算供试溶液的浓度（μg/mL)，并进一步计算出每片维生素C中维生素C的含量（mg／片）。

五、注意事项

抗坏血酸会缓慢地氧化成脱氢抗坏血酸，每次实验必须配制新鲜溶液。