1．方法原理
测定水中BOD的微生物传感器是由氧电极和微生物菌膜构成，其原理是当含有饱和溶解氧的水样进入流通池中与微生物传感器接触，水样中溶解性可生化降解的有机物受到微生物菌膜中菌种的作用，使扩散到氧电极表面上氧的质量减少。当水样中可生化降解的有机物向菌膜扩散速度（质量）达到恒定时，此时扩散到氧电极表面上氧的质量也达到恒定，因此产生了一个恒定电流。由于恒定电流与水样中可生化降解的有机物浓度的差值与氧的减少量存在定量关系，据此可换算出水样中生物化学需氧量。

2．干扰及消除

当水样中的氰化物和亚硫酸根离子分别超过20mg/L和1000mg/L以上时，使测定结果产生较大误差。

水样中含Co2+: 10mg/L以下；Mn 2+: 5mg/L以下；Zn2+: l0mg/L以下；Fe 2+: 5mg/L以下；Cu2+: 2mg/L以下；Hg 2+: 5mg/L以下；Pb: 5mg/L以下；Cd: 5mg/L以下对本方法测定结果不产生明显的干扰。对微生物膜内菌种有毒害作用的高浓度杀菌剂、农药类、游离氯废水，用本方法测定会产生较大误差，可减少取样量或适当稀释试样以减少这类影响。

3．方法的适用范围

本方法适用于测定BOD浓度为2-500mg/L的水样，当BOD较高时可经适当稀释后测定。适用于测定地表水、生活污水、工业废水中的BOD。

4．仪器

使用的玻璃仪器及塑料容器要认真清洗，不能有可生物降解的化合物，操作中应防止染。

①BOD快速测定仪：按说明书使用并选择测量条件。

②微生物菌膜：微生物菌膜可在室温干燥条件下保存。

③微生物菌膜的活化与安装：将微生物菌膜放入0.005mo1/L缓冲溶液中活化48h，然后将其安装在微生物传感器上（如果间断测量时间超过7d，则应重新更换新的菌膜，按操作步骤③中要求进行）。

④稀释容器：容量瓶、吸管、比色管，其容积大小取决于稀释样品的体积。

⑤10L聚乙烯塑料桶。

5．试剂

①磷酸盐缓冲溶液，0.5mol/L：将68g磷酸二氢钾和71g磷酸氢二钠溶于蒸馏水中，稀释至l000ml，备用。

②磷酸盐缓冲溶液使用液：0.005mo1/L，用①稀释制得。

③盐酸（HCl )溶液：0.5mo1/L。

④氢氧化钠（NaOH）溶液：20g/L。

⑤亚硫酸钠（Na2SO3 )溶液：1.575g/L，此溶液不稳定，需当天配制。

⑥葡萄糖一谷氨酸（BOD）标准溶液：称取在103℃下干燥1h并冷却至室温的无水葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH）各1.705g,溶于磷酸盐缓冲溶液2)中，并用此溶液稀释至1000m1,混合均匀，即得2500mg/的BOD标准溶液。

6．步骤

(1)样品的贮存

样品需充满并密封于瓶中，置于2-5℃下保存，一般应在采样后6h之内进行检验，若需远距离转运，在任何情况下贮存皆不得超过24h.

(2）水样的预处理

①水样的pH值超出5.5-9.0范围时，可用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH约为7，但调节溶液的用量不要超过水样体积的0.5%。若水样的酸度或碱度很高，可改用高浓度的碱或酸液进行中和。应注意操作中不要带入气泡。

②水样浑浊时，可将水样静置澄清30min，然后取上层非沉降部分进行测定。

③从水温较高的水域或废水排放口取得的水样，则应迅速使其冷却至20℃左右，并充分振摇，使与空气中氧分压接近平衡。

④从水温较低的水域或富营养化的湖泊中采集的水样，可遇到含有过饱和溶解氧，此时应将水样迅速升温至20℃左右。在水样瓶未充满的情况下，充分振摇，并时时开塞放气，以赶出过饱和的溶解氧。

⑤测定样品中含游离氯或结合氯时，向被测样品中加入相当质量的亚硫酸钠溶液使样品中游离氯或结合氯除去，注意避免亚硫酸钠加过量。

(3)测定

①每次测定前应将电极电位洗至相对稳定。

②用标准溶液6）配制成含BOD 0mg/L、5mg/L、10mg/L、25mg/L、50mg/L的标准系列，按由低到高的顺序依次进行测量，制备工作曲线（贮存在仪器中）。然后进行被测水样的测定。微处理器根据内存曲线、样品信号，可直接计算出测量结果。

7．精密度和准确度

四个实验室分析BOD含量为25.3mg/L和10.3mg/L的统一标准溶液，其分析结果如下：

①重复性：实验室内相对标准偏差分别为2.9%、2.6%

②再现性：实验室间相对偏差分别为3.4%、2.7%。

③准确度：四个实验室测定浓度为50.6m叭的统一已知BOD样品，相对误差为0.4%。

8．注意事项

①进样时应避免输液管路进入气泡。

②勿使其他溶液漏入电极内参比溶液中，以免造成污染。

③测量过程中的进样浓度应从低到高，以减少回复到空白电位所需的时间。

④关机后再开机至少间隔15s，否则仪器不能正常工作。