1．方法原理

在温度为30-35℃，用活性污泥强制曝气降解样品2h，经重铬酸钾消解生物降解前、后的样品，测定生物降解前和生物降解后的化学需氧量，其差值即为BOD，可根据与标准方法的对比实验结果换算为BODS。

2．干扰及消除

能使活性污泥中毒的物质，如杀菌剂、农药等，会抑制生物氧化作用，使生化需氧量测定结果偏低。挥发性有机物含量高时测定BOD5结果偏低。

3．方法的适用范围

本方法适用于城市污水和组成成分较稳定的工业废水中生化需氧量的测定。取50m1水样不稀释可测定8-2000mg/L范围的生化需氧量。

4．仪器

①BOD培养器：可自动恒温30-50℃，连续曝气48h以上，并能对活性污泥进行曝气培养。

② BOD降解管：与BOD培养器配套使用，容积为150m1。

③活性污泥培养器：恒温2530℃可与BOD培养器连接连续曝气。

④高速离心机：最高转速可达到16000r/min。

⑤低速离心机：转速400^-4000r/min。

⑥离心管：20m1，具刻度。

5．试剂

1)营养盐溶液：

①磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4), 21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4),33.4g磷酸氢二钠（Na2HPO4）和1.7g氯化按溶于500m1水中，用水稀释至l 000m1。

②硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁（MgSO4 )溶于水中，用水稀释至l 000m1。

③氯化钙溶液：将27.5g氯化钙（CaC12）溶于水中，用水稀释至l 000m1。

④氯化铁溶液：将0.25g氯化铁（FeC13 )溶于水中，用水稀释至l 000m1。

2）活性污泥：

①采集与保存：将生化处理厂曝气池活性污泥装入塑料桶中（不要超过容积的2/3),并用2-3层纱布罩在桶口上。在实验室保存活性污泥，可连接在生物培养器装置上，曝气保存；也可将污泥澄清，弃去上清液，装于塑料瓶中，在0-4℃冰箱中保存。使用时将污泥倒入培养器中，加入葡萄糖5-10g，待测废水10-50ml,磷酸盐缓冲溶液l0ml，在25-35℃曝气培养24h。活性污泥也可以用废水，加营养液、葡萄糖曝气培养，生长出絮状胶体，即活性污泥。

②活性污泥的预处理：取约18ml污泥倒入20ml刻度离心管中，在1400r/min下，离心3min，弃去上清液。再加入活性污泥，反复几次，待刻度离心管中的污泥约为3ml，用水洗5-6次，备用。检查活性污泥是否洗净，采用紫外扫描方法，即将活性污泥洗涤6次，取离心后的上清液在220-370nm扫描，并同时与水空白比较，两条吸收曲线相近即可。

6．步骤

①取2.00ml混合均匀的水样（或经稀释后的水样2.00m1 ),测定COD前值。

②取50ml混合均匀的水样（或经稀释后的水样50ml )于BOD降解管中。

③加入洗净的活性污泥3ml，氯化钙溶液1ml，硫酸镁溶液1ml，三氯化铁溶液1m1,缓冲溶液5m1。

④将BOD降解管置于BOD培养器中，连接气路。在30-35℃连续曝气2h。如液面降低，需加水至原体积摇匀，静置。

⑤取上层清液3-5m1在高速离心机上，以14000r/min的速度，离心分离3min，然后迅速取2.00ml上层清液，测定COD后值。

7．计算

生化需氧量BOD由下式计算：

BOD (O2, mg/L）=（COD前-COD后）

BOD5 (O2, mg/L）=bx+a

式中：COD 前——降解前COD值（mg/L) ;

COD后——降解后COD值（mg/L) ;

x—一本方法测得的BOD5值（mg/L) ;

b——稀释接种法与本方法测定结果回归曲线的斜率；

a——稀释接种法与本方法测定结果回归曲线的截距。

8．精密度和准确度

不同类型废水BOD的加标回收率在90%-110％之间。

9．注意事项

①活性污泥的性状是试验成功的关键，在培养活性污泥时，要掌握好污泥生长的条件：即温度在25-30℃;曝气量充分，并能不断搅拌；使碳、氮、磷有适当比例；只用废水驯化污泥，可以测定各种不同的工业废水。

②曝气时间可以通过对降解进程中水样的直接扫描来确定。如0、1、1.5、2、2.5、2.8h,波长为220-380nm。如降解前后两条扫描曲线几乎重合，即可认为：在相应条件下，水样降解己达到终点。此时间为2.5h，则今后对于这种废水降解时间定为2.5h。

③高速离心活性污泥测定COD后，吸样时，不能带进污泥，否则COD后高，测定结果偏低。

④从经过验证的印染、造纸、毛纺、制革、石化、焦化、冶炼、城市污水、油田、电厂、制药、麻纺的废水BOD5与BOD的测定值经统计回归，其斜率0.45-0.69，平均0.558,其产生的误差为+10.8％-13.2%。正负未超过25%。因此，规定其换算系数为b=0.558。截距最大值3.6，最小值0.51，平均为2.06，规定截距为a=2则在一般情况下，上述已验证过的工业废水，其换算公式为：BOD5=0.558x十2 (x=BOD5，单位为mg/L）。对于未经验证的废水，需用同一水样做BOD5和BOD经统计回归，再进行换算。

⑤在测定标样时，由于葡萄糖、谷氨酸在规定条件下，可降解90％以上，因此换算系数从0.655-0.75，平均为0.703。