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聚丙烯酰胺凝胶电泳技术试剂配制

发布时间:2015-09-12 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:910

30%聚丙烯酰胺贮存液:取29. 0g丙烯酰胺,1. 0g N, N-甲叉双丙烯酰胺,用双蒸水溶解并定容至100m1,配制成30%聚丙烯酰胺贮存液。过滤后置于棕色瓶中,4℃保存(可用30天)。

电泳缓冲液(pH 8. 3 ):取0.3g Tris base、1.88g Glycine、 0.1gSDS,加双蒸水定容至100m1。

分离胶缓冲液贮存液(1. 5mo1/L Tris·Cl, pH8. 8 ):将9. 08g Tris溶解在40ml双蒸水中,用 4mo1/L盐酸调节pH至8.8,再用双蒸水定容至50m1, 4℃保存。

浓缩胶缓冲液贮存液((0. 5mol/L Tris·Cl, pH6. 8 ):将3. 03 gTris溶解在40m1双蒸水中,用4mol/L盐酸调节pH至6.8,再用双蒸水定容至50ml。 4℃保存。

10% SDS; 25g SDS,用双蒸水定容至250ml,室温保存。

10%过硫酸铵(APS ):0. 1 g过硫酸铵,用1 ml双蒸水溶解,使用前新鲜配制,4℃保存,最长不应超过1周。

染色液:称取考马斯亮蓝R -250 0. 1g加甲醇(或乙醇)40m1(或50ml ),冰醋酸l0ml,用双蒸水定容至l00ml,搅拌彻底溶解后,过滤置于棕色瓶中保存。

脱色液:与染色液相同,但不含考马斯亮蓝R-250。

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