1 范围

GB/T 18932的本部分规定了蜂蜜中泰乐菌素残留量酶联免疫测定方法。

本部分适用于蜂蜜中泰乐菌素残留量的测定。

本部分的方法检出限：泰乐菌素为10.0 ug/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB/T 18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。

GB/T 6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性(GB/T 6379-1986,neq ISO 5725:1981)

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-1992,neq ISO 3696;1987)

3 原理

试样中残留的泰乐菌素与试剂盒中的泰乐菌素酶标记物共同竞争泰乐菌素抗体，形成的酶标记抗原抗体复合物与显色剂发生反应，用酶标仪测定吸光度，根据吸光度值得出试样中泰乐菌素的含量。

4 试剂和材料

4.1 泰乐菌素试剂盒：

4.1.1 96孔板：12条×8孔。

4.1.2 泰乐菌素标准溶液。

4.1.3 标准和样品缓冲溶液：浓缩液。

4.1.4 泰乐菌素酶标记物。

4.1.5 酶标记物缓冲溶液。

4.1.6 洗板溶液：浓缩液。

4.1.7 显色剂。

4.1.8 反应停止液。

4.2 缓冲溶液：将标准和样品缓冲溶液(4.1.3)按泰乐菌素试剂盒(4.1)中规定的比例用水稀释，混匀后备用。

4.3 泰乐菌素标准工作溶液：根据泰乐菌素试剂盒的线性范围，用稀释的缓冲溶液(4.2)将泰乐菌素标准溶液(4.1.2)稀释成不同浓度(ug/L)的标准工作溶液。每次测定均应现配现用。

4.4 泰乐菌素酶标记物溶液：根据泰乐菌素试剂盒中说明，用酶标记物缓冲溶液(4.1.5)将泰乐菌素酶标记物(4.1.4)溶解，混匀后备用。

4.5 洗板工作溶液：将洗板溶液(4.1.6)按泰乐菌素试剂盒中规定的比例用水稀释，混匀后备用。

4.6 水：GB/T 6682规定的一级水。

5 仪器

5.1 酶标仪。

5.2 8道移液器：50 uL～300uL。

5.3 单道移液器：5uL～50uL、100uL～1000uL和2mL～10mL。

5.4 液体混匀器。

5.5 离心机。

5.6 注射过滤器：2 mL，并带有孔径为0.45 um的水相针头式过滤膜。

5.7 具塞试管：10 mL，20mL。

6 试样的制备与保存

6.1 试样的制备

对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的实验室样品，在密闭的情况下，置于不超过60℃的水浴中温热、振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温，分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并加以标识。

6.2 试样的保存

将样品于室温下保存。

相关链接：蜂蜜中甲硝哒唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑残留量的测定方法（二）

文章来源：《常用兽药残留量检测方法》

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