不溶性微粒检查法系用以检查静脉用注射剂(溶液型注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液)及供静脉注射用无菌原料药中不溶性微粒的大小及数量。本法包括光阻法和显微计数法。当光阻法测定结果不符合规定或供试品不适于用光阻法测定时，应采用显微计数法进行测定，并以显微计数法的测定结果作为判定依据。光阻法不适用于黏度过高和易析出结晶的制剂，也不适用于进入传感器时容易产生气泡的注射剂。对于黏度过高，采用两种方法都无法直接测定的注射液，可用适宜的溶剂稀释后测定。

(一)第一法(光阻法)

光阻法是当液体通过一窄细检测通道时，与液体流向垂直的入射光，由于被供试液中的微粒阻挡而减弱，因此由传感器输出的信号降低，这种信号变化与微粒的截面积大小相关，再根据通过检测区供试液的体积，计算出每1 ml供试液中含10um及10um以上以及含25 um及25um以上的不溶性微粒数。

1．试验环境、仪器与用具

(1)实验环境：实验操作环境应不得引入外来微粒，测定前的操作在洁净工作台进行。玻璃仪器和其他所需的用品均应洁净、无微粒。本法所用微粒检查用水(或其他适宜溶剂)，使用前须经不大于1.0um的微孔滤膜滤过。

(2)仪器装置：通常包括定量取样器、传感器和数据处理器三部分。测量粒径范围为2～100um，检测微粒浓度为0～10000个/毫升。

(3)仪器的校准：所用仪器应至少每6个月校准一次。

2．操作方法

(1)取50ml微粒检查用水(或其他溶剂)，经微孔滤膜(一般孔径为0.45um)滤过，置于洁净的适宜容器中，旋转使可能存在的微粒均匀，静置待气泡消失。按光阻法项下的检查法检查，每10ml中10um及10um以上的不溶性微粒应10粒以下，含25um及25um以上的不溶性微粒应2粒以下口否则表明微粒检查用水(或其他溶剂)、玻璃仪器或实验环境不适于进行微粒检查，应重新进行处理，检测符合规定后方可进行供试品检查。

(2)供试品应事先除去外包装，并用净化水将容器外壁冲洗干净，置适宜实验环境中备用。

(3)标示装量为25ml或25ml以上的静脉用注射液或注射用浓溶液：除另有规定外，取供试品至少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心翻转20次，使溶液混合均匀，立即小心开启容器，先倒出部分供试品溶液冲洗开启口及取样杯，再将供试品溶液倒人取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气，置于取样器上(或将供试品容器直接置于取样器上)。开启搅拌，使溶液混匀(避免气泡产生)，每个供试品依法测定至少3次，每次取样应不少于5 ml，记录数据，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

(4)标示装量为25 ml以下的静脉用注射液或注射用浓溶液：除另有规定外，取供试品至少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心翻转20次，使溶液混合均匀，静置2分钟或适当时间脱气，小心开启容器，直接将供试品容器置于取样器上，开启搅拌或以手缓缓转动，使溶液混匀(避免产生气泡)，由仪器直接抽取适量溶液(以不吸人气泡为限)，测定并记录数据，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

若注射用浓溶液黏度太大，不便直接测定，可经适当稀释，依法测定。也可以采用适宜的方法，在洁净工作台上小心合并至少4个供试品的内容物(使总体积不少于25ml)，置于取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气，置于取样器上。开启搅拌，使溶液混匀(避免气泡产生)，依法测定至少4次，每次取样应不少于5 ml。弃第一次测定数据，取后续3次测定数据的平均值作为测定结果，根据取样体积与每个容器的标示装量体积，计算每个容器所含的微粒数。

(5)静脉注射用无菌粉末：除另有规定外，取供试品至少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心开启瓶盖，精密加入适量微粒检查用水(或适宜的溶剂)，小心盖上瓶盖，缓缓振摇使内容物溶解，静置2分钟或适当时间脱气，小心开启容器，直接将供试品容器置于取样器上，开启搅拌或以手缓缓转动，使溶液混匀(避免气泡产生)，由仪器直接抽取适量溶液(以不吸入气泡为限)，测定并记录数据；弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。也可以采用适宜的方法，取至少4个供试品，在洁净工作台上用水将容器外壁洗净，小心开启瓶盖，分别精密加入适量微粒检查用水(或适宜的溶剂)，缓缓振摇使内容物溶解，小心合并容器中的溶液(使总体积不少于25ml)，置于取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气，置于取样器上。开启搅拌，使溶液混匀(避免气泡产生)，依法测定至少4次，每次取样应不少于5 ml，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

(6)供注射用无菌原料药：按品种项下规定，取供试品适量(相当于单个制剂的最大规格量)4份，分别置取样杯或适宜的容器中，照(5)静脉注射用无菌粉末项下方法，自“精密加入适量微粒检查用水(或适宜的溶剂)，缓缓振摇使内容物溶解”起，依法操作，测定并记录数据，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

3．注意事项

(1)光阻法不适用于黏度过高和易析出结晶的注射液。对于一些溶解性差的样品，样品在管道中与水相混时，可能会在局部析出沉淀，这不仅会使检查结果偏高，也可能造成管路堵塞，出现该种情况应考虑采用显微计数法。

(2)供试品的检查数量：为确保检查结果具有统计学意义，除另有规定外，一般应取供试品4瓶(支)以上进行不溶性微粒检查。在多支样品的测定过程中，应尽量保持操作的一致性(如容器翻转次数、取样方式、除气泡方式、搅拌速度等)，以确保测定结果的可靠性。

(3)对于小容量注射液，可以采用直接取样法测定，也可以采用多支内容物合并法测定。直接取样法可考察多支样品检查结果的重现性，体现各容器间的差异。当选用直接取样法测定时，为避免供试品溶液与仪器管路中的水在相溶过程中可能产生气泡、乳光等导致测定数据偏高的现象，应先将前几个容器的测定数据弃去，使供试品溶液充满管路，然后读取后续容器的测定数据作为供试品的测定结果。在小容量注射液直接取样的检测过程中，一定要避免吸入气泡。一旦吸入气泡，应使用微粒检测用水或其他适宜溶剂对管路进行充分清洗，直至气泡消失。当采用合并法取样时，其关键步骤在于安瓿的打开和内容物的取出。玻璃安瓿是小容量注射剂的主要包装形式，虽然通常都为易折安瓿 但在实际操作中很多安瓿并不“易折”，尽管用砂轮割锯安瓿会大量增加微粒，但有时却是开启安瓿时的必要操作步骤。实际操作中如果在割锯之后直接掰开，会大量引入微粒。经实验比较，认为在保证开启安瓶的情况下应尽量减少划痕的长度和力度，掰开前增加用水清洗的操作过程。安瓿打开后，大量微粒集中于玻璃断口处，经实验比较，认为用干净注射器抽取转移的方法可以减少瓶口碎屑的干扰。此外，采用较粗的针头抽取溶液，可减少气泡的产生。

(4)注射用无菌粉末一般先用微粒检查用水或适宜溶剂溶解后，再采用直接取样法或合并取样法测定。在某些品种(如头孢替唑钠、头孢曲松钠等)的检测中发现，同一批样品采用不同体积的溶剂溶解后，微粒测定结果差异较大，这可能与药物性质等因素有关。经实验研究，这些品种在某一个浓度范围内，不溶性微粒数与主药浓度呈线性关系，故这些品种一般在正文项下均规定了不溶性微粒测试溶液的浓度，应依法操作。

(5)当光阻法测定结果不符合规定时，应采用计数法进行复验，并以显微计数法为判断依据：

4．结果与判定

(1)表示装量为100ml或100ml以上的静脉用注射液除另有规定外，每1ml中含10um及10um以上的微粒不得过25粒，含25um及25um以上的微粒不得过3粒，判为符合规定。

(2)标示装量为100m1以下的静脉用注射液、静脉注射用无菌粉末、注射用浓溶液及供注射用无菌原料药除另有规定外，每个供试品容器(份)中含10um及10um以上的微粒数不得过6000粒，含25um及25um以上的微粒不得过600粒。

相关链接：注射剂中可见异物

文章来源：《实用化学药品检验检测技术指南》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。