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一、色层分离法
色层分离法又称色谱分离法,是一种在载体上进行物质分离的系列方法的总称。这是应用最广泛的分离方法之一,尤其对一系列有机物质的分析测定,色层分离具有独特的优点。根据分离原理的不同,可分为吸附色谱分离、分配色谱分离和离子交换色谱分离等。此类分离方法分离效果好,而且分离过程往往也是鉴定的过程。近年来在食品检验中应用越来越广泛。
(1)吸附色谱分离:是利用聚酰胺、硅胶、硅藻土、氧化铝等吸附剂经活化处理后所具有的适当的吸附能力,对被测成分或干扰组分进行选择性吸附而达到分离的方法称吸附色谱分离。例如:聚酰胺对色素有强大的吸附力,而其他组分则难于被其吸附,在测定食品中色素含量时,常用聚酰胺吸附色素,经过过滤洗涤,再用适当溶剂解吸,可得到较纯净的色素溶液,供检验用。
(2)离子交换色谱分离:是利用离子交换剂与溶液中的离子之间所发生的交换反应进行分离的方法。分为阳离子交换和阴离子交换两种。
当将被测离子溶液与离子交换剂一起混合振荡,或将样液缓缓通过用离子交换剂做成的离子交换柱时,被测离子或干扰离子即与离子交换剂上的H+或OH一发生交换,被测离子或干扰离子留在离子交换剂上,被交换出的H+或OH-,以及不发生交换反应的其他物质留在溶液内,从而达到分离的目的。离子交换分离法常用于分离较为复杂的样品。
二、浓缩
食品样品经提取、净化后,有时净化液的体积较大,待测物溶质的浓度过小,因此,在测定前需要进行浓缩。
浓缩过程中挥发性强、不稳定的微量物质容易损失,要特别注意,当浓缩至体积很小时,一定要控制浓缩速度不能太快,否则将会造成回收率降低。浓缩回收率要求)90%。浓缩的方法有自然挥发法、吹气法、K·D浓缩器浓缩法和真空旋转蒸发法。
(1)自然挥发法:将待浓缩的溶液置于室温下,使溶剂自然蒸发。此法浓缩速度慢,但简便。
(2)吹气法:采用吹干燥空气或氮气,使溶剂挥发的浓缩方法。此法浓缩速度较慢,对于易氧化、蒸汽压高的待测物,不能采用吹气法浓缩。
(3)K·D浓缩器浓缩法:采用K·D浓缩装置进行减压蒸馏浓缩的方法。此法简便,待测物不易损失,是较普遍采用的方法。
(4)真空旋转蒸发法:在减压、加温、旋转条件下浓缩溶剂的方法。此法浓缩速度快、待测物不易损失、简便,是最常用、理想的浓缩方法。
样品预处理方法应用时应根据食品的种类、检验对象、被测组分的理化性质及所选用的检验方法选择。
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