3.2.1.5 样品前处理

(1)试样制备

实验样品混合均匀，分出0.5kg作为试样。试样置于-18℃冰柜，避光保存。

(2)牛奶和奶粉待测样品的制备

1)牛奶样品提取和初净化

称取牛奶样品8g(精确到0.01g)，置于100mL离心管中，加入30m L5%磷酸溶液，置于振荡器上振荡提取10min，加入3mL三氯乙酸溶液涡旋混合后在4000r/min下离心10min。上清液全部倒入下接苯磺酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用5mL 5%磷酸溶液和10mL水洗涤苯磺酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。用20mL磷酸盐缓冲溶液洗脱至50mL离心管中。

2)奶粉样品提取和初净化

称取奶粉样品1g(精确到0.01g)，置于100mL离心管中，加入8mL水，涡旋混合后，再加入30 mL磷酸溶液，置于振荡器上振荡提取10min，加入3mL三氯乙酸溶液涡旋混合后在4000 r/min下离心10min。上清液全部倒入下接苯磺酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用5mL 5%磷酸溶液和10mL水洗涤苯磺酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。用20mL磷酸盐缓冲溶液洗脱至50mL离心管中。

3)样品溶液再净化

上述洗脱液倒入下接羧酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用10mL水和10mL 25%甲醇溶液洗涤羧酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。减压抽干羧酸型固相萃取柱30min。用2mL SPE洗脱液洗脱至5mL刻度离心管中，用SPE洗脱液定容至2.0mL，混匀后过0.2um滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。

4)基质混合标准校准溶液的制备

A.牛奶基质混合标准校准溶液的制备

称取五个阴性牛奶样品10g(精确到0.01g)，分别置于100mL具塞离心管中，加入适量混合标准溶液，其余按上述提取净化步骤操作完成，制成链霉素、双氢链霉素和卡那霉素含量均为5.0ug/kg、10.0 ug/kg、20.0ug/kg、100.0ug、kg和200.0ug、kg的基质标准溶液。

B.奶粉基质混合标准校准溶液的制备

称取五个阴性奶粉样品1g(精确到0.01g)，分别置于100mL具塞离心管中，加入适量混合标准溶液，其余按上述提取净化步骤操作完成，制成链霉素、双氢链霉素和卡那霉素含量均为40.0ug/kg、80.0 ug/kg、160.0ug/kg、800.0ug/kg和1600.0ug、kg的基质标准溶液。其余按上述提取净化步骤操作完成。

(3)河豚鱼和鳗鱼待测样品的制备

1)样品提取和初净化

称取河豚鱼或鳗鱼样品10g(精确到0.01g)，置于100mL离心管中，加入30mL 5%磷酸溶液均质3min，并用5%磷酸溶液清洗均质器刀头合并洗涤液，加入3mL三氯乙酸溶液涡旋混合后在4000r/min下离心10min。上清液全部倒入下接苯磺酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用5mL 5%磷酸溶液和10mL水洗涤苯磺酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。用20mL磷酸盐缓冲溶液洗脱至50mL离心管中。

2)样品溶液再净化

上述洗脱液倒入下接羧酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用10mL水和10mL25%甲醇溶液洗涤羧酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。减压抽干羧酸型固相萃取柱30min。用2mL SPE洗脱液洗脱至5mL刻度离心管中，用SPE洗脱液定容至2.0mL，混匀后过0.2um滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。

3)基质混合标准校准溶液的制备

称取五个阴性河豚鱼或鳗鱼样品10g(精确到0.01g)，分别置于100mL具塞离心管中，加入适量混合标准溶液，其余按上述提取净化步骤操作完成，制成链霉素、双氢链霉素和卡那霉素含量均为5.0 ug/kg、10.0ug/kg、20.0ug/kg、100.0ug/kg和200.0ug/kg的基质标准溶液。

(4)蜂王浆待测样品的制备

1)样品提取和初净化

称取蜂王浆样品10g(精确到0.01g)，置于100mL离心管中，加入30mL 5%磷酸溶液，均质3min并用5%磷酸溶液清洗均质器刀头合并洗涤液，加入3mL三氯乙酸溶液涡旋混合后在4000r/min下离心10min。上清液全部倒入下接苯磺酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用5mL 5%磷酸溶液和10mL水洗涤苯磺酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。用20mL磷酸盐缓冲溶液洗脱至50mL离心管中。

2)样品溶液再净化

上述洗脱液倒入下接羧酸型固相萃取柱的贮液器中，在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用10mL水和10mL甲醇溶液洗涤羧酸型固相萃取柱，弃去全部流出液。减压抽干羧酸型固相萃取柱30min。用2mL SPE洗脱液洗脱至5mL刻度离心管中，用SPE洗脱液定容至2.0mL，混匀后过0.2um滤膜，供液相色谱-串联质谱测定。

3)基质混合标准校准溶液的制备

称取五个阴性蜂王浆样品10g(精确到0.01g)，分别置于100mL具塞离心管中，加入适量混合标准溶液，其余按上述提取净化步骤操作完成，制成链霉素、双氢链霉素和卡那霉素含量均为5.0 ug/kg、10.0ug/kg、20.0ug/kg、100.0ug/kg和200.0ug/kg的基质标准溶液。

文章来源：《兽药多组分残留分析技术》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。