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自动化、高通量的处理趋势

发布时间:2014-12-06 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1065

随着科技的发展和检测的需要,固相萃取经历了一个从实验室简单的柱层析发展到工业化生产的,具有良好重现性的SPE柱,从手工操作到自动化的发展过程。目前,越来越多的自动化固相萃取仪器问世,这些自动化仪器可以将操作人员从繁琐、重复的劳动中解放出来,提高分析结果的重现性。

但是,从时间上看,并没有真正解决高通量的问题。因为目前的自动化固相萃取仪器本身并不能加快样品前处理的速度,与手工固相萃取相同,自动化固相萃取必须按照萃取步骤一步一步地进行。

然而,在许多食品、环境监测实验室,面对的样品有时是几百个,甚至上千个。虽然市面上有一些多通道自动化固相萃取仪器,例如,吉尔森公司的八通道SPE 215固相萃取仪等,但依然无法解决高通量的问题。另外,由于许多自动化固相萃取仪都是针对药物分析的需求而开发的,样品的用量和馏分收集量都有一定的限制,无法满足食品检测的需要。因此,今后将会有一批高通量、适合不同分析领域要求的自动化固相萃取仪器问世,以适应各种日常检测分析的需求。

小型化、简单化

小型化、简单化是样品前处理的发展趋势,固相萃取技术也不例外。虽然经典的固相萃取技术在今后相当长的一段时间里依然会占主导地位,但是,人们并不会原地踏步,停滞不前。例如,基于固相萃取的基本原理,瑞典AstraZeneca公司发明了微固相萃取技术,其全称为填充吸附剂微萃取(microextraction bypacked sotbent,MEPS)。为了有别于固相微萃取(SPME),我们将这项技术简称为微固相萃取。MEPS具有样品用量小、速度快等特点,是小型化的SPE 。与经典的固相萃取不同,MEPS是将大约1 mg固相吸附剂装填在注射管或注射器针头与针管之间的萃取节中,其操作方法与吸嘴型固相萃取相似。对于血浆、全血样品,基本方法如下:

血浆预处理:用水按1:4(体积比)稀释,然后离心。

全血预处理:用水或缓冲溶液按1:20(体积比)稀释,然后离心。

目标物吸附:用带MEPS的注射器吸取并排放经上述处理的样品。根据样品浓度,可以增加排放次数。当样品通过固相填料时,目标化合物被吸附剂吸附。

杂质洗涤:50 μL水或含少量甲醇(>10%)的水溶液除去蛋白质及弱吸附干扰物。

目标物洗脱:20~50μL有机溶剂或LC流动相将目标物洗脱出来。

如果使用HPLC自动进样器,上述过程可以自动完成。如果采用程序升温进样口,这一过程也可以在GC或GC-MS上自动完成。

从理论上说,常规固相萃取填料的种类都可以用于MEPS。由于现阶段MEPS的主要应用领域是对生物液中药物的萃取,例如,血浆或尿液中麻醉品、抗癌药物、β-抗阻剂等。因此,现有的MEPS填充吸附剂主要有C18、C8、C2、C8-阳离子交换剂混合型材料等。

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