1.罗兹-哥特里法(碱性乙醚提取法)(依据GB 5413.3-2010)

此法为国际标准化组织(ISO)、联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)等采用，为乳及乳制品等脂类定量的国际标准法。

(1)原理利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中而脂肪游离出来，用乙醚和石油醚抽提样品的碱水解液，通过蒸馏或蒸发去除溶剂，测定溶于溶剂中的抽提物的质量。

(2)试剂除非另有规定，本法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682-2008规定的三级水。

①淀粉酶：酶活力≥1.5U/mg。

②氨水：质量分数约25%(可使用比此浓度更高的氨水)。

③乙醇：体积分数至少为95%。

④乙醚：不含过氧化物，不含抗氧化剂，并满足试验的要求。

⑤石油醚：沸程30～60℃。

⑥混合溶剂：等体积混合乙醚和石油醚，使用前制备。

⑦碘溶液：约0.1mol/L。

⑧刚果红溶液(C₃₂H₂₂Na₆Na₂O₆S₂)：将1g刚果红溶于水中，稀释至100mL。

⑨盐酸(6mol/L)：量取50mL 12mol/L盐酸缓慢倒入40mL水中，定容至100mL，混匀。

(3)仪器

①分析天平：感量为0.1mg。

②离心机：可用于放置抽脂瓶或管，转速为500～600r/min。

③电热恒温水浴。

④烘箱。

⑤抽脂瓶：抽脂瓶应带有软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞(如硅胶或聚四氟乙烯)。软木塞应先浸于乙醚中，后放入60℃或60℃以上的水中保持至少15min，冷却后使用。不用时需浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。

(4)操作步骤

①脂肪收集瓶的准备：于干燥的脂肪收集瓶中加入几粒沸石，放入烘箱中干燥1h。然后使脂肪收集瓶冷却至室温，称量，精确至0.1mg。

②空白试验：用10mL水代替试样作空白试验。

③测定：

a.精确吸(称)取一定量样品(牛乳10.00mL；乳粉1～5g，用10mL 60℃水溶解)于抽脂瓶中。

b.加入2.0mL氨水，充分混合后立即将抽脂瓶放入(65±5)℃的水浴中，加热15～20min(不时取出振荡)。取出冷却至室温。静置30s后可进行下一步骤。

c.加入10mL乙醇，缓和但彻底地进行混合，避免液体太接近瓶颈。如果需要，可加入两滴刚果红溶液。

d.加入25mL乙醚，塞上瓶塞，将抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夹到摇混器上，按约100次/min振荡1min，也可采用手动振摇方式，但均应注意避免形成持久乳化液。抽脂瓶冷却后小心地打开塞子，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈，使冲洗液流入抽脂瓶。

e.加入25mL石油醚，塞上重新润湿的塞子，按d中所述，轻轻振荡30s。

f.将加塞的抽脂瓶放入离心机中，在500～600r/min下离心5min。或将抽脂瓶静置至少30min，直到上层液澄清，并明显与水相分离。

文章来源：《食品理化检测技术》

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