(一)概述

氯化苦化学名称为三氯硝基甲烷，又名硝基氯仿、氯苦、氯化苦味酸等，分子式CC3NO2，相对分子质量大，沸点高，挥发性、扩散性与渗透性都较差，易被粮食、器材等吸附，是一种重要熏蒸剂，对常见储粮害虫有良好的毒效，并有一定杀菌作用，是我国最早使用的粮食熏蒸杀虫剂之一。氯化苦是一种毒性很强的毒气，具有催泪及窒息作用。对人的毒性主要是对细胞的阻碍作用，是一SH酶的强力阻碍剂，对琥珀酸脱氢酶有阻碍作用。

据国外有关文献报道，氯化苦常在熏蒸后散气30d，小麦和小麦粉中仍残留0．2mg／kg和0．9mg／kg。由于氯化苦毒性大，对稻米食品品质影响也大，所以现在使用氯化苦的国家很少，日本于1 972年已停止使用。我国食品卫生标准规定，原粮中氯化苦允许量≤0．2mg／kg。

(二)偶氮分光光度法测定

1．原理

氯化苦可被乙醇钠分解形成亚硝酸盐，在弱酸性溶液中与氨基苯磺酸进行重氮化，然后再与N-1-萘基乙二胺盐酸偶合生成紫红色，与标准系列比较定量。

2．试剂

乙醇钠溶液(取金属钠，先用滤纸将表面煤油吸干，并用小刀切去表面被氧化部分，切下表面部分，务必放回煤油中，切勿与水接触，然后取5g切成碎片，量取1000mL无水乙醇，置于大烧杯中，将切好的金属钠立即分次加入，待作用完毕，杯中不再有气体发生时，移入棕色瓶中备用)j无水乙醇、4g/L对氨基苯磺酸溶液、2g／LN-1-萘基乙二胺溶液、氯化苦标准储备溶液(量取约20mL无水乙醇，置于50mL容量瓶中，准确称量后，加入2滴氯化苦，再准确称量，两次的差即为氯化苦质量，加无水乙醇至刻度，混匀)。氯化苦标准使用液：按式(7—3)计算，吸取适量氯化苦标准储备溶液，置于50mL容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，此溶液1mL相当于O．020mg氯化苦，储存于冰箱中。

X=(50×0.02×50)/m

式中，X为吸取氯化苦标准储备溶液的体积，mL；m为氯化苦的质量，mg。

3．仪器

分光光度计。

4．分析步骤

称取约20．00g样品，置于100mL具塞锥形瓶中，加20mL乙醇钠溶液，盖好，放置暗处8～10h或过夜，过滤，量取5．0mL滤液，置于10mL比色管中。

吸取5．0mL氯化苦标准使用液，置于50mL容量瓶中，加20mL乙醇钠溶液，放置暗处8～10h或过夜，再加无水乙醇稀释至刻度，然后吸取0、1．0mL、2．0mL、3．0mL、4．0mL、5．0mL此液(相当于o、2μg、4μg、6μg、8μg、10μg氯化苦)，分别置于10mL比色管中，再各加无水乙醇至5mL，加36％的乙酸1mL。

于样品及标准管中各加1mL对氨基苯碘酸(4g／L)，混匀，静置3～5min后，各加入0．5mL N-1-萘基乙二胺溶液(2g／L)，加无水乙醇至刻度，混匀后放置20min，用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。

5．计算

   A×1000
X=──────────────
      m×(V2/V1)×1000

式中，X为样品中氯化苦的含量，mg／kg；A为测定用样品中氯化苦的质量，μg；V1为样品中加入乙醇钠总体积，mL；V2为测定用样品滤液的体积，mL；m为样品质量，g。

结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。