(一)概述

磷化物包括磷化铝、磷化钙和磷化锌，在酸、碱、水或光的作用下，均能产生有毒的磷化氢气体。磷化氢是一种无色高效剧毒的气体．相对分子质量小，沸点低，易挥发，扩散性以及渗透性强，吸附性小，在我国粮食储藏害虫防治方面使用非常广泛。磷化氢对人的毒性主要作用于神经系统，抑制中枢神经．刺激肺部，引起肺水肿和使心脏扩大，其中以神经系统受害最严重。在磷化氢熏蒸过程中．粮食对磷化氢有一定的吸附作用，但经充分通风散气后，磷化氢在粮食中的残留量通常很低。我国食品卫生标准规定，原粮中磷化物(以磷化氢即PH3计)允许量≤O．05mg kg。

(二)定性测定方法

1．原理

磷化物遇水和酸放出磷化氢．与硝酸银生成黑色磷化银，如有硫化物存在，同时放出硫化氢，与硝酸银生成黑色硫化银，干扰测定，而硫化氢又能与乙酸铅生成黑色硫化铅，以此证明是否有硫化物干扰。

2．试剂

酒石酸、100g／L硝酸银溶液、100g／L乙酸铅溶液、100g／L乙酸镉溶液。

3．仪器

取200～250mL锥形瓶，配一适宜双孔软木塞或橡皮塞，每孔内塞以内径O．4～0．5cm、长5cm的玻璃管，每管内悬挂一长7cm、宽0．3～0．5cm的滤纸条，临用时，一纸条用硝酸银溶液湿润，另一纸条用乙酸铅溶液湿润。

4．分析步骤

迅速称取20．0g样品，置于锥形瓶中，加适量水至浸没样品，再加约0．5g酒石酸，立即塞好准备好的双孔塞，使滤纸条末端距液面约5cm，在暗处置40～50℃水浴内加热30min，观察试纸颜色变化情况。如试纸均不变色，表明磷化物呈阴性反应或未超过规定；如硝酸银试纸变色，乙酸铅试纸不变色，表示可能有磷化物存在，需再定量；如两种试纸均变色，可能有磷化物和硫化物同时存在或仅有硫化物存在，遇此情况，重取样品，加水后再加5mL乙酸镉溶液(100g／L)，使形成黄色硫化镉沉淀，立即密塞，放置10min，再加酒石酸，操作同前，如硝酸银试纸变黑，乙酸铅试纸不变色，表示有磷化物存在，需再定量。

(三)定量测定方法(钼蓝法)

1．原理

磷化物遇水和酸放出磷化氢，蒸出后用酸性高锰酸钾溶液吸收，并被氧化成磷酸，与钼酸铵作用生成磷钼酸铵，遇还原剂氯化亚锡反应生成蓝色化合物钼蓝，生成的钼蓝蓝色深浅与PH3含量的多少成正比，可与标准系列比较定量。

5PH₃+8KMnO₄+12H₂SO₄→5H₃PO₄+8MnSO₄+4K₂SO₄+12H₂O

24(NH₄)₂Mo(O₄+2H₃PO4+21H₂SO₄→2[(NH₄)₃PO₄·12MoO₃]+21(NH₄)₂S0₄+24H₂O

(NH4)3PO4·12MoO3+SnCI2+5HCl→3NH₄Cl+SnCl₄+2H₂O+(Mo₂O₅·4MoO₃)2·HPO₄

2．试剂

16．5g／L高锰酸钾溶液、3．3g／L高锰酸钾溶液、硫酸(1+17，取28mL硫酸缓缓加入400mL水中，冷却后加水至500mL)、硫酸(1+5，取83．3mL，硫酸缓缓加入400111L水中，冷却后加水至500mL)、饱和亚硫酸钠溶液、钼酸铵溶液(50g／L)、氯化亚锡溶液(取0．1g氯化亚锡，溶于5mL盐酸中，临用时现配)、盐酸(1+1)、饱和硝酸汞溶液、饱和硫酸肼溶液、酸性高锰酸钾溶液(16．5g／L高锰酸钾溶液和2mol／L硫酸等量混合)、磷化物标准溶液[准确称取0．0400g经105℃干燥过的无水磷酸二氢钾，溶于水，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度(可加1滴三氯甲烷以增加保存时间)，此溶液1mL相当于0．10mg磷化氢]、磷化物标准使用液(吸取10．0mL磷化物标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀，此溶液1mL相当于10μg磷化氢)。

3．仪器

1，6-分液漏斗；2-二氧化碳；3~5-洗气瓶；7-水浴；8-反应瓶；9~11-气体吸收管。

4．分析步骤

(1)以二氧化碳为载气

①样品管的制备 向3个串联的气体吸收管中各加5.00mL高锰酸钾溶液(3.3g／L)和1.00mL硫酸(1+17)，在二氧化碳发生瓶中装入大理石碎块，在洗气瓶3中加入饱和硝酸汞溶液；在洗气瓶4中加入酸性高锰酸钾溶液；在洗气瓶5中加入饱和硫酸肼溶液。向分液漏斗1中加适量的盐酸(1+1)，作为二氧化碳发生器，二氧化碳气体顺序经洗气瓶3、4、5洗涤后，进入反应瓶中(如用氮气代替二氧化碳，可以只通过硫酸肼溶液安全瓶直接进入反应瓶)。预先通二氧化碳(或氮气)5min，打开反应瓶的塞子，迅速投入称好的50．0g样品，立即塞好瓶塞，加大抽气速度，从分液漏斗6中的5mL硫酸(1+17)和80mL水加至反应瓶中，然后减慢抽气和二氧化碳(或氮气)气流速度，将放置反应瓶的水浴加热至沸半小时，并继续通入二氧化碳(或氮气)。反应完毕后，先除去气体吸收管进气的一端，再除去抽气管的一端，取下3个气体吸收管，分别滴加饱和亚硫酸钠溶液使高锰酸钾溶液褪色，合并吸收管中的溶液至50mL比色管中，气体吸收管用少量水洗涤，洗液并入比色管中，加4．4mL硫酸(1+5)、2．5mL钼酸铵溶液(50g／L)混匀。

②制备标准系列 吸取0、0.10mL、0.20mL、0.30mL、0.40mL、0.50mL磷化物标准使用液(相当于0、1μg、2μg、3μg、4μg、5μg磷化氢)，分别放入50mL具塞比色管中,加30mL水、5．40mL硫酸(1+5)、2．5mL。钼酸铵溶液(50g／L)，混匀。

③显色和比色于样品管及标准管中各加水至50mL混匀，再各加0．10mL氯化亚锡溶液，混匀。15min后，用3cm比色杯，以零管调节零点，于波长680nm处测吸光度，绘制标准曲线比较，或与标准色列目测比较。取与处理样品量相同的试剂，按同一操作方法做试剂空白试验。

(2)以空气为载气 以空气代替二氧化碳。空气顺序经装有酸性高锰酸钾溶液，碱性焦性没食子酸溶液(5g焦性没食子酸溶于15mL水，48g氢氧化钾溶于32mL水中,然后两液混合)的洗气瓶洗涤后进入反应瓶。后续操作与以二氧化碳为载气中的操作方法相同。

X=[(A1—A2)×1000] / m×1000

式中，X为样品中磷化物的含量(以磷化氢计)，mg／kg；A1为测定用样品磷化物的质量，μg；A2为试剂空白中磷化物的质量，μg；m研为样品质量，g。