3.4 测定步骤

3.4.1提取及净化

称取2.00g均匀试样，入15 mL离心管内，加入0.5 mL 10％硫酸钠水溶液和4.4 mL乙腈-氯仿混合溶剂(10+1)。在涡流混匀器上剧烈混合成匀浆，以提取磺胺。其后，离心3 min (3500r/min)。用尖嘴吸液管将上清液转入第二支15mL离心管内，再用2 mL乙腈-氯仿混合溶剂(10+1)提取残渣，离心3 min，提取液并入第二支离心管。将该离心管置于气流加热快速浓缩装置中，于＜40℃蒸发至干。向残渣添加1 mL 2％硫酸钠水溶液和2 mL正己烷，在涡流混匀器上剧烈混合，使残渣溶解，离心3 min。用尖嘴吸液管移去己烷层，并弃去。再用2 mL正己烷洗水相一次，同法弃去己烷相，分别向水相中加入3 mL、2 mL乙腈-氯仿混合溶剂(1+2)，于涡流混匀器上剧烈混合，以便混合溶剂从水相中反提取磺胺，离心3 min。用尖嘴吸液管将下层有机相转入第三支离心管内，置于气流加热快速浓缩装置内，于＜40℃蒸发至干。以流动相溶解残渣，并准确定容1 mL。于16000 r/min离心5 min，上清液供LC测定。

3.4.2 测定

3.4.2.1 色谱条件

a．色谱柱：不锈钢柱，250 mm×4.6mm(内径)，填充物10 um ODS。

b．柱温：45℃。

c．流动相：乙腈-乙酸-水(18+1+81)。

d．流动相流速：1.10 mL/min。

e．检测器：UV285 nm。

f．衰减：0.04AUFS。

g．纸速：5 mm/min,

h．试样量：10uL。

3.4.2.2 色谱测定

分别向液相色谱仪注入等体积标准工作液和样液，在45℃，以1.10 mL/min的流速洗脱，用UV检测器于285 nm处检测，记录色谱峰高，并与相应的标准峰高进行比较，外标法定量。

在上述条件下，保留时间(min)为：磺胺6.0，磺胺嘧啶8.3，磺胺吡啶8.8，磺胺噻唑9.8，磺胺甲嘧啶10.5，磺胺甲噻二喹12.2,磺胺二甲嘧啶13.1，磺胺氯哒嗪16.7，磺胺甲基异噁哇19.3，磺胺二甲异噁唑23.6。

3.4.3 空白试验

除不加试样外，按上述步骤进行。

3.4.4 结果计算和表述

用色谱数据处理机或按下列公式计算：

式中：X—磺胺残留量，mg/kg;

h—样液中磺胺的峰高，mm;

h_s—标准工作溶液中磺胺的峰高，mm;

c—标准工作溶液中磺胺的浓度，ug/mL;

m—称取的试样量，g;

V—样液最终定容体积，mL。

注：计算结果需扣除空白值。

4 方法的测定低限和回收率

4.1测定低限：5 ug/kg。

4.2 同收率

回收率的实验数据，浓度范围在0.05～0.25 mg/kg时，回收率各为：

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

版权与免责声明：转载目的在于传递更多信息。

如其他媒体、网站或个人从本网下载使用，必须保留本网注明的"稿件来源"，并自负版权等法律责任。

如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起两周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。