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一、概述
食品中脂类(lipids)包括脂肪(fats)和类脂质(lipoids),是一大类可溶于有机溶剂,但难溶于水的化合物。食物中95%以上的脂类由各种甘油三酯组成,其他则由种类繁多的类脂组成,统称为脂肪。
食品中脂肪以游离态和结合态两种形式存在,其中游离态含量较多,结合态较少。游离态脂肪可以被乙醚、三氯甲烷或其他有机溶剂直接提取,但有些食品中的脂肪,如乳脂肪虽属游离脂肪,但脂肪球被酪蛋白钙盐包裹,并处于高度分散的胶体中,经碱处理可使酪蛋白钙盐溶解,才能被有机溶剂萃取。而结合态脂肪是脂蛋白、磷脂和糖脂等复杂混合物,只有在一定条件下水解转变成游离脂肪后,才可被有机溶剂萃取。
脂肪是人类所需的三大宏量营养素之一,是人体能量的主要来源,人体所需能量的20%~30%来源于膳食脂肪。膳食脂肪可以提供人体内不能合成的必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸,它们是所有细胞膜的重要构成物质,在机体内具有多种生理功能。膳食脂肪摄入的质和量与健康密切相关。此外,在食品加工中脂肪对食品的色、香、味起着重要作用,直接影响着其感官性状。各种食品所含脂肪的量各不相同,植物性或动物性油脂中脂肪含量高,而蔬菜、水果中脂肪含量低,人类膳食脂肪主要来源于动物脂肪组织、肉类及植物的种子。某些食品的脂肪含量见表4-3。
表4-3 食品中脂肪含量
食品中脂肪含量和组成是食品营养价值评定的重要指标。国家食品标准规定了某些食品脂肪含量标准,例如,酸奶的脂肪含量应≥3.0%,鸡全蛋粉的脂肪含量应≥42.0%,鸡蛋蛋黄的脂肪含量应≥60.0%,硬质干酪的脂肪含量应≥25.0%。
二、脂肪检验
食品中脂肪检测方法主要有索氏(Soxhlet)抽提法和酸水解法(GB/T 5009.6)及罗紫-哥特里法和盖勃法(GB 5413.3)。通常是先用有机溶剂提取食品中脂肪,然后用重量法测定。用有机溶剂直接提取食品中脂肪时,因少量的磷脂、色素、树脂、固醇、高级醇和游离脂肪酸等脂溶性成分与脂肪一起会被提取出来,故所测得的脂肪称为粗脂肪(crude fat)。如果先加酸或碱进行处理,使食品中结合脂肪游离出来,再用有机溶剂提取,所得的脂肪称为总脂肪(total fat)。
(一)索氏抽提法
1.原理在索氏提取器中,以无水乙醚或石油醚等有机溶剂回流提取样品中的脂肪,挥去溶剂,称取残留物的质量,即可测得样品中粗脂肪的含量。
2.分析步骤将干燥后的样品装入滤纸袋中,封口,称重后放入索氏提取器的提取筒内(图4-5),高度不要超过虹吸管;连接已干燥至恒重的接收瓶,加入有机溶剂至接收瓶内容积的2/3,于水浴上回流提取。提取完毕后,取下接收瓶,回收有机溶剂,待其中的有机溶剂剩下1~2ml时,于水浴上蒸干,再于(100±5)℃烘干后称量至恒重。
图4-5 索氏脂肪提取器
1.球瓶;2.提取筒;3.冷凝管
3.方法说明
(1)样品必须充分烘干并磨细,因为样品含水或颗粒大时溶剂不易浸透,会降低提取效率。可用测定食品中水分后的样品测定其脂肪含量。
(2)用于食品中脂肪测定的有机溶剂乙醚或石油醚应无水和过氧化物。含水的醚会同时提取水溶性的非脂成分,使脂肪的测定值偏高;含有过氧化物会导致脂肪氧化,在烘烤时也会有爆炸的危险。
(3)石油醚与乙醚相比,具有较高的沸点,用作脂肪提取剂时,没有胶溶现象,不会夹带胶溶的淀粉、蛋白质等物质,所以用石油醚提取的成分比较接近食品中所含的脂类。
(二)酸水解法
1.原理食品样品经酸水解后,使结合脂肪或包裹在组织里的脂肪游离出来,再加乙醚萃取,去除溶剂后即为总脂肪含量,包括游离脂肪和结合脂肪。
2.分析步骤称取样品,加水混匀后加盐酸,待样品水解完全,加入乙醇混合,用乙醚分次提取脂肪,并用石油醚-乙醚等量混合液冲洗容器上附着的脂肪,待静置分层后,取上清液,挥去溶剂,干燥、冷却后称量,直至恒重。
3.方法说明
(1)水解后加入一定量的乙醇,使能溶于乙醇的物质进入水相,减少某些非脂成分进入醚层。但由于乙醇既能溶于水也能溶于乙醚,会影响分层,加入石油醚,可降低乙醚的极性,促进乙醇进入水层,使乙醚层能与水层分离。若出现浑浊,可记录醚层体积后,将其取出加入无水硫酸钠脱水,过滤后,取一定体积的乙醚提取液,烘干称重。
(2)本法适用于各类食品中脂肪的测定,对固体、半固体、黏稠液体或液体食品,特别是加工后的食品,容易吸湿、结块,不易烘干的食品,用此法能获得较满意的结果。
三、脂肪酸检验
食品中脂肪酸是决定脂肪品质的重要指标之一,脂肪的营养价值在很大程度上决定于脂肪酸的组成和含量。分析脂肪酸种类和含量的常用的方法是气相色谱法(GB/T 22223)。
1.原理在碱性条件下甘油三酯和磷脂水解成脂肪酸,再将其甲酯化生成脂肪酸甲酯,经毛细管气相色谱分离,内标法定量测定脂肪酸甲酯含量,然后折算成各脂肪酸的含量。内标物为十一碳酸甘油三酯。
2.分析步骤
(1)样品处理:待测样品中加入焦性没食子酸和十一碳酸甘油二酯内标溶液,再分别加入95%乙醇和盐酸溶液后进行水解;用乙醚和石油醚萃取样品中的脂类,挥去溶剂;将脂肪萃取物与氢氧化钠、甲醇和三氟化硼混合后回流进行衍生化,加入正庚烷、饱和氯化钠水溶液,振摇,取上层正庚烷,用无水硫酸钠脱水干燥,过有机膜,待测。
(2)测定:色谱参考条件为毛细管柱(交联键合固定相,含50%氰丙基,60m×0.25mm,0.25um);进样口温度:270℃,检测器温度:280℃,载气为高纯氮。分流比50 : 1;柱温程序升温:初始温度130℃,保持1分钟;6.5℃/min升温到170℃,接着2.75℃/min升温到215℃,保持12分钟;然后继续以4℃/min的速率升温到230℃,保持3分钟。
分别取脂肪酸甲酯标准溶液和样品溶液进行色谱分析,以脂肪酸甲脂标准品的保留时间定性,内标法计算各脂肪酸甲脂的含量。
3.方法说明
(1)食用油样品不经脂肪提取,直接进行皂化和甲酯化,其他食品需经酸水解后,加乙醚提取脂肪,再进行皂化和甲酯化。
(2)三氟化硼有毒,操作需在通风橱里进行。所制备的脂肪酸甲酯应尽快分析,以防止自动氧化。
(3)脂肪酸甲酯换算成脂肪酸的换算系数为:脂肪酸i的分子量/脂肪酸甲酯i的分子量。
相关链接:食品中氨基酸检验
文章来源:《食品理化检验》
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