紫外-可见分光光度计可分为两类，单波长分光光度计和双波长分光光度计。单波长分光光度计又可分为单光束和双光束两类。下面介绍几类分光光度计。

10.2.1.1单光束分光光度计

单光束分光光度计是最简单的分光光度计，它只有一束单色光、一只比色皿、一只光电转换器(光电管)，其结构简单、价格便宜。此类仪器的工作原理如图10-6所示。单光束分光光度计的操作程序为：先旋转单色器选择测定波长；机械调零；接通电源，进行暗电流补偿；打开光源，将参比溶液置入光路，调节狭缝宽度或光栏大小以改变光通量，或调节电子放大器的灵敏度，使透光率至100％；测定溶液的吸光度。

图10-6 单光束分光光度计原理图

单光束分光光度计在使用时要求配置电子稳压器(也可改用稳定的直流电源)，并需注意每改变一次测定波长时，用参比溶液重调使透光率为100％。

10.2.1.2双光束分光光度计

双光束分光光度计的构造中，由光源发出的光经过单色器后分成两束，一束通过参比池，一束通过样品池，一次测量即可得到样品的吸光度。目前常用的紫外-可见分光光度计均为双光束型，如图10-7所示。

图10-7 双光束型紫外-可见分光光度计

10.2.1.3双波长分光光度计

双波长分光光度计由同一光源发出的光被分成两束，分别经过两个单色器，得到两束不同波长(λ₁和λ₂)的单色光。然后，利用切光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池，然后经过光电倍增管和电子控制系统，最后由显示器显示出两个波长处的吸光度差值△A(△A=A₁-A₂)，如图10-8所示。对于多组分混合物、混浊试样分析，以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰的情况下，利用双波长分光光度分析法，往往能提高方法的灵敏度和选择性。利用双波长分光光度计，能获得导数光谱。通过光学系统转换，使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长工作方式。如果能在A₁和A₂处分别记录吸光度随时间变化的曲线，还能进行化学反应动力学研究。

图10-8 单波长和双波长分光光度计的组成示意图

光电比色计和紫外-可见分光光度计属于不同类型的仪器，但其测定原理是相同的，不同之处仅在于获得单色光的方法不同，前者采用滤光片，后者采用棱镜或光栅等单色器。由于两种仪器均基于吸光度的测定，它们统称为光度计。不同类型的分光光度计构造有所差异，但工作原理完全相同，其基本组成也大致相同。

相关链接：光吸收的基本定律

文章来源：《分析化学分析方法的原理及应用研究》

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