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平板电泳法已收载于多国药典中,作为某些药物的鉴别、纯度检测、含量测定和分子量测定的法定方法。
虽然作为药品检验的常规方法,CE在药品标准中的应用实例还不多,但在药物分析中的应用研究已经非常广泛,可分为化学分析、中药成分分析、手性对映体分析、体内分析等。被分析的物质有离子、小分子药物、基因工程产品、蛋白、手性对映体等。样品来源为各种药物及其制剂、天然产物、复方制剂及各种生物样品等。
1.含量分析
作为HPLC的变通和互补方法,CE已广泛用于药物的定量分析。
2.杂质分析
应用CE法对杂质定量,与液相色谱法相似。
3.手性对映体
CE应用于对映体分离时,一般可以直接在缓冲液或流动池中加入手性添加剂。环糊精就是一种常用的手性添加剂,此外,常用的添加剂还有冠醚、胆盐、表面活性剂、多肽等。由于具有无需手性分离柱,手性添加剂用量少,适用范同广等特点,CE已成为实现手性分离的一种重要手段。
加兰他敏对映异构体的测定
加兰他敏(Galantamine)是从石蒜属植物中分离的一种生物碱,加兰他敏的S型对映异构体是药效成分,通过测定R型对映体含量来监控药物质量十分必要。该药物的测定方法有非水滴定法、紫外分光光度法和高效液相色谱法,它们均不能分离和测定对映异构体。用cE法可分离分析加兰他敏对映异构体,以控制药物质量。
测定法背景电解质为pH=3的30mmoL/L的Na2HPO4缓冲液体系,内含40mmol/L的a-环糊精。压力进样(1s缓冲液,2s样品),分离电压为12kV,于214nm处进行紫外检测,柱温恒定在25℃。
该原料药含有10个组分,测定R型单体电泳峰面积与浓度关系的工作曲线,线性范围0.015~1.0mmol/L,相关系数r2=0.9992,相对于活性成分的最低定量限为0.12%,最低检测限为0.04%(s/N=3)。根据峰面积计算出原料药物中R型单体浓度为0.82%(n=5),R与s的含量比1.0%(n=5),5次重复测定的迁移时间和峰面积的标准偏差分别为0.20%和2.6%,可成为快速有效的控制药物质量方法。
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