3．关于测试点离开截止点距离的选择

测试点离开透光点的距离称之为△λ，到底△λ取多少为好呢？Edisbury认为，取5～10nm以外，会低估杂散光；若取20m。处，则可低估50％。Richard等认为，从取值大于离开光谱带中央10倍有效带宽为好。但是，如前所述，国外许多科技工作者和有关厂商，在测试HPLC(光谱仪器)的杂散光时，所取的△λ各不相同。例如，日本日立公司在340nm处用NaNO₂(50g/L)水溶液，但50g/L的NaNO₂水溶液在300～385nm的波长范围内，长波处产生的透过率为10^-4，即385nm处产生的透过率为10^-4。此时，测试点离透光点的△λ=385-340=45(nm)；而在测试220nm处的杂散光时，他们则用NaI(10g% L)水溶液；NaI(10g/L)水溶液的光谱特性为0～258nm处不透光，所以，此时测试点离透光点的△λ=258-220=38(nm)。岛津在220nm处的杂散光测试时，也用NaI(10g/L水溶液)，同样，其△λ=38nm。美国Varian公司对220nm处的杂散光测试时，也用 NaI(10g/L水溶液)，同样，其△λ=38nm。

过去，我国广大科技工作者在测试220nm处的杂散光测试时，用NaBr(10g/L水溶液)。NaBr(10g/L水溶液)在195～223nm内，长波处产生的透过率为10^-4，即在223nm处的透过率为10^-4，我们忽略它，即假设223nm处的透过率为0。故取220nm时，△λ=223-220=3(nm)。因为测试点离透光点的距离短(仅3nm)，所以测出的杂散光偏大。

综上所述，目前国内外许多厂商或科技工作者，在对HPLC的杂散光测试时，△λ一般取39～45nm；国内曾有人取△λ为3nm。作者认为，△λ取20～45nm为好。作者的理论计算和实践提供了以下证据。

(1)若用R₄₇₆光电倍增管作为测试装置中的光接收器，则取20nm左右时，测得的杂散光强度或光电流大小一般约为1.0×10^-8 A。它既可保证一般光电倍增管(如R₄₅₆、R₉₂₈、1P₂₈等)输出的信噪比(S/N；S为信号大小，N为噪声，即光电倍增管的暗电流I_d)大于或等于2倍以上，又可保证光电倍增管工作在线性区。作者在用JB6、ZWB1等国产滤光片测试55W光栅单色仪的杂散光时，取△λ=20nm，杂散光信号的大小为0.00002V左右，再根据所用的光电倍增管(R₄₅₆)和整个测试装置的各种参数，可以很简单地计算出杂散光产生的暗电流为1.0×10^-8A左右，光通量为1.0×10^-8 1m左右，完全可保证光电倍增管工作在线性区。若取△λ<20nm，仍用R₄₅₆光电倍增管作为光接收器，则光电流有可能增大，甚至有可能使光电倍增管不能工作在线性区。因此，不能得到满意的结果。

(2)△λ取20～45nm时，上述滤光片材料的吸收系数一般在4Abs左右，即△λ取20～45nm时，透过率在10^-4左右。在这种情况下测得的杂散光，一是置信度高，二是能满足高精度的光谱测试。

(3) Richard等指出：杂散光一般来自标称波长附近几百个埃(1=0.1nm)的范围内，所以，取△λ=20～45nm时，既有代表性，又能保证测试结果的可靠性。

4．被测波段及测试点数量的选择

W. Slavin认为：杂散光通常在紫外区，但实际上应测量整个光谱区的两个端点的杂散光才能说明问题。日本岛津公司对杂散光的测试，都只测量340nm和220nm两点；而美国Beckman对杂散光的测试时，则测量 220nm、340nm、370nm、680nm四个点；美国P-E公司对杂散光的测试时，则测量220nm、340nm、370nm三个点；我国许多科技工作者在测试杂散光时，一般都只测220nm或632.8nm一个点，但大多数都测220nm、340nrn两个点。作者曾对220～650nm光谱范围内的 55w光栅单色仪测试过220nm、357nm、430nm、446nm四点的杂散光。到底应该选择几个测试点为好呢？如何选择测试波段呢？我的实践证明，W.Slavin的观点是可取的。并且，作者认为Richard等针对杂散光测试所提出的“光栅做分光元件的HPLC中间区域校验不可忽视”也是很重要的。作者根据自己的实践，认为HPLC杂散光的测试时应该取三点为好，即整个波段范围内的两个端点，加上一个中间位置的点(最好在换灯处)为最好。因为这样做，已考虑到了上述一切可能发生的非正常情况，更能保证和反映整机杂散光的实际情况。

5，关于测试时使用的光源的选择

ASTM认为：一般测试紫外区的杂散光时采用氘灯、氢灯或氙灯做光源，而可见光区则用钨灯(工作温度为2850～3300K)做光源。若在可见区用氙灯做光源时，主要用滤光片去掉不需要的光。在红外区测试杂散光时，则用能斯脱(Nernst)或白炽灯，但要注意光源的温度调节。国内也有人用He-Ne激光器做光源测试杂散光。

作者在实践中体会到，紫外区用氘灯作光源最好。其理由如下。

(1)氘灯电源不如氙灯复杂，容易制作。氢灯做光源也是可以的，但是因为其能量不如氘灯，所以目前已经被淘汰。

(2)氘灯发出的热量比氙灯少，不需要像氙灯那样的散热装置，所以比较简单。

(3)在紫外区氘灯的能量较集中，一般其光强或能量分布的峰值位置在250～260nm。

在可见光区，则用ASTM规定的白炽灯较好。不管是紫外区还是可见区，都不宜用氙灯做光源，因为氙灯的红外线太强，会给杂散光的测试工作带来许多麻烦。此外，不管用哪种光源，必须注意其供电电源的稳定性(氘灯用恒流电源、钨灯用恒压电源)。此外，作者认为选用He-Ne激光器做光源不大理想，因为只能测得632.8nm附近的杂散光，不能完全反映紫外可见分光光度计整机紫外区的杂散光水平；但在可见区它仍有使用价值。

6.关于光电转换器(光接收器)的选择

一般国外的科技工作者在测试杂散光时，基本上都采用光电倍增管做光接收器；红外区则用热电偶、热敏电阻等。根据作者长期的实践，在紫外光区、可见光区，用光电倍增管R₄₅₆、R₉₂₈做光接收器为最好；在红外区用真空热电偶或硫化铅(PbS)为最好。但用光电倍增管时(也可用光电池)，若用直流法检测光电流，则必须扣除光电倍增管的暗电流，否则，将暗电流当杂散光计算，会使测量结果增大一个数量级以上。而用热电元件时，最好采用交流法来检测光电流，因为热电元件的噪声一般都很大。而用交流法时可以基本上消除热噪声对测量的影响。

此外，在使用光电倍增管时，还应注意选择光电倍增管的供电电源：作者的实践证明：必须选用电压稳定度(电压调整率)优于5×10^-4的高压稳压电源供电，才可保证得到好的测试结果。例如，作者在测试55W光栅单色仪的杂散光时，开始用电压稳定度(电压调整率)为4×10^-3(实测数据)的高压稳压电源给R₄₅₆供电，结果测出的杂散光达到1.0×10^-2(实际上是因为电源电压不稳，而导致光电倍增管的放大倍数不稳所致)。后来，改用自制的优于5×10^-4的高压稳压电源给R₄₅₆供电，其他条件都不变，结果55W光栅单色仪的杂散光实测值为3×10^-3。

所有分析仪器(包括光学、机械、电子学等的主要部件)的性能技术指标的测试，是要根据有关被测试对象的标准(国家标准或行业标准)进行的：但是．目前有很多分析仪器还没有行业标准或国家标准，或者说国家标准还很不完善，设计者应该如何处理呢？这是一个较难处理的问题。积作者的实践经验、教训，认为凡是有国家标准或行业标准的仪器，从设计开始，必须严格按国家标准或行业标准进行。在整个制造过程中，更加要严格按国家标准或行业标准进行。凡是没有国家标准或行业标准的仪器，在设计制造时，最好参考国际先进国家的标准或仪器，也可以自己提出设计、制造、测试大纲(或企业标准)，经本单位主要领导签名，报上级备案(或审批)后，可以作为暂行标准执行。对于不完善的国家标准(甚至有些是错误的标准，例如用重铬酸钾测试HPLC的光栅单色器的波长准确度等)，可以提出意见，但还是应该参照执行，待下次修改标准时更正。