二价铁能与邻菲罗啉反应生成橙红色络合物，在波长510nm范围处测量吸光度，用工作曲线法测定未知水样中二价铁的含量。在工作曲线的绘制基础上，经讲解了解水体中铁的来源及邻菲罗啉比色法测定二价铁的原理，并根据国家环境水质检测的标准方法(邻菲罗啉分光光度法)对现有水样进行二价铁测定，测定过程中严格遵守操作规范并做
好数据记录。

一、所用试剂和设备

1．试剂

(1)铁的标准贮备液：准确称取0.7020g硫酸亚铁铵(NH₄)₂Fe(SO₄)₂·6H₂O，将其溶于50m1的(1+1)硫酸中，充分搅拌溶解后，转移至l000ml容量瓶中，容量瓶加水至标线后摇匀。此溶液的含铁量为100ug/ml。

(2)铁标准使用液：准确移取铁标准贮备液25ml，将其置于100m1的容量瓶中，容量瓶加水至标线后摇匀。此溶液的含铁量为25ug/ml。

(3)(1+3)盐酸：为1体积浓盐酸和3体积水混合。

(4)10％盐酸羟胺溶液：准确称取10g盐酸羟胺将其溶解于100mL水中。

(5)缓冲溶液：准确称取40g乙酸铵入到加50ml冰乙酸中，转移至100ml容量瓶中，容量瓶加水至标线后摇匀。

(6) 0.5％邻菲啰啉水溶液：准确称取0.5克邻菲啰啉于水中溶解，若溶解困难可以加数滴盐酸帮助溶解，然后将其转移至100ml容量瓶中，容量瓶加水至标线后摇匀。

2．仪器

(1)分光光度计。

(2)分析天平：精度±0.001g。

(3)锥形瓶：150mL。

(4)移液管：5、10、50mL。

(5)比色皿：10mm。

(6)具塞比色管：50mL。

(7)洗耳球。

二、注意事项

(1)由于每批试剂的铁含量如不同，因此每次新配一次试液，都需要重新绘制校准曲线。

(2)含有CN^-或S^2-离子的水样在进行酸化时。必须小心进行，因为会产生有毒气体。

(3)如果水样含铁量比较高，可以进行适当稀释；若浓度低时也可换用30mm或50mm的比色皿。

[任务实施]

一、校准曲线的绘制

1．工作液的配制：用移液管一次移取铁标准使用液0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.0ml分别置于6支150m1锥形瓶中，加入蒸馏水至50.0ml；

2．药剂的投加：向锥形瓶中加入(1+3)盐酸1ml, 10％盐酸羟胺1ml，再放入玻璃珠1～2粒。将锥形瓶加热煮沸至溶液剩15ml左右时，冷却至室温，然后定量转移至50ml具塞比色管中。加一小片刚果红试纸，滴加饱和乙酸钠溶液至试纸刚刚变红，加入5ml缓冲溶液、0.5％邻菲啰啉溶液2ml，加水至标线，摇匀；

3．比色定量：将上述溶液显色15min后，用10mm比色皿，以纯水为参比，在510nm处测量各管的吸光度并记录下来；

4．工作曲线的绘制：以铁离子浓度为横轴，吸光度为纵轴作6个标准点的标准曲线。

二、亚铁的测定

1．采样：将2ml盐酸放如100ml具塞水样瓶内，将水样注满样品瓶，塞好瓶塞防止氧化，一直保存到进行显色和测量(最好现场测定或现场显色)；

2．药剂的投加：取适量水样于50ml具塞比色管中，加入5ml缓冲溶液和2m10.5％邻菲啰啉溶液，加水至标线，摇匀；

3．比色定量：显色5～10min后，在510nm处以水为参比测量吸光度，并作空白校正；

4．查询Fe^2＋浓度：然后根据样品的吸光度在标准曲线中查得样品的Fe^2＋浓度。

三、数据记录

在510nm处测量各标准溶液的吸光度并记录下来。

四、铁浓度的计算：

式中：m—校准曲线中查询的铁的含量，单位为微克(ug)；

V—水样的体积，单位为毫升(mL)。