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对疑为菌血症或败血症者,临床上应进行急症处理,尽快采集血液进行培养,以发现、识别病原微生物。血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义。
(一)总体要求
1.血培养的临床指征患者出现以下一种或几种临床表现时可作为血培养的重要指征。
①发热(≥38℃)或低温(≤36℃),以间歇弛张型多见,革兰阴性杆菌,如大肠埃希菌引起的感染可见双峰热。
②寒战。
③白细胞增多(>10.0×109/L,特别是有“核左移”时)。
④粒细胞减少(<1.0×109/L)。
⑤血小板减少。
⑥皮肤黏膜出血,常见于溶血性链球菌感染的菌血症,伤寒患者第4~1.0天可出现玫瑰疹,斑疹伤寒第4~6天可出现暗红色斑丘血疹。
⑦昏迷。
⑧多器官衰竭。
⑨血压降低。
⑩呼吸加快(呼吸率大于每分钟20次或CO2分压小于32 mmHg)以及肝脾肿大、关节疼痛、C反应蛋白、内毒素、降钙素原升高等。
2.血培养标本采集时机一般情况下,在患者发热初期或发热高峰期,在使用抗菌药物之前采集血培养标本。若患者已用抗菌药物治疗,则应选择含有抗菌药物吸附物的培养瓶,并在下一次抗菌药物应用前采血培养。
3.血培养的次数对怀疑为菌血症、败血症的成人患者,推荐同时或在短时间间隔(10 min)内从不同部位(如双臂)采集2~3套血培养标本,做到“双瓶双侧”。如有必要可同时或在短时间间隔内从下肢静脉采血接种于第3套培养瓶。在采集血培养后的2~5天内不需要重复采集血培养。只有在疑似感染性心内膜炎或导管相关性感染患者的连续性菌血症时,在不同时间点采血才有必要。婴幼儿患者需要同时采集2次(不同部位)血培养标本。
4.血培养的采血量成年患者推荐的采血量为20~30 ml,每套不少于10 mL,每瓶不少于5 mL。婴幼儿患者推荐的采:血量应少于患儿总血容量的1%,每瓶不少于2 ml。
5.血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配以一个需氧瓶和一个厌氧瓶为一套血培养,作为常规血培养的组合。当采血量比推荐的采血量少时,应首先满足需氧瓶,剩余标本再接种人厌氧瓶。
(二)标本的采集和运送
1.采集方法
(1)皮肤消毒与防止血培养污染:使用碘伏、碘酊、次氯酸或洗必泰作为血培养的皮肤消毒剂,碘酊的作用时间不能少于30 s,碘伏的作用时间则需要1.5~2 min。
(2)标本采集部位:从两侧上肢静脉采血,“双瓶双侧”采血培养。必要时从下肢静脉采血做第3套血培养。
(3)减少血培养污染的注意事项:采血之前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%异丙醇酒精消毒并干燥,然后进行穿刺部位的皮肤消毒。严格无菌操作,不允许在皮肤消毒后用手接触待穿刺部位,除非带有无菌手套。采用真空采血装置能降低污染率。
2.标本运送采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温保存,切勿冷藏。标本接种到培养瓶后,需轻轻颠倒混匀以防止血液凝固。接种后的培养瓶应及时送实验室,最迟不能超过2h。自动化连续监测系统虽有允许延迟上机监测微生物生长的功能,还是应该尽量减少延迟上机时间,否则可能导致检测时间延长甚至出现假阴性结果。
3.标本拒收标准遇到以下血培养标本时应拒收并且要求重新采集标本。
①血培养瓶上贴的标签错误或未贴标签。
②血培养瓶渗漏、破裂或有明显污染。
③血液凝固。
(三)血液标本采集与质量控制
血液标本采集与质量控制包括患者评估、血培养标准操作规程(SOP)的制定和培训、样本运送、样本接收和处理。
1.患者评估要求定期统计以下数据,作为质量评估指标。
(1)按照推荐血培养采集数量采血培养的患者所占比例。
(2)超过推荐血培养采集数量采血培养的患者所占比例。
血培养能为患者的诊疗提供关键信息,有十分重要的临床价值,但是,血培养的污染问题一直难以完全解决,造成了部分患者出现假阳性结果。因此,要把握血培养的指征,保证血培养的质量,正确分析其临床价值。推荐一段时间内采集血培养2~3套,如果48~72 h后均未呈阳性,则可采集另外2~3套血培养。不建议把血培养作为疗效监测指标而每日采血培养。
2.血培养标准操作规程(SOP)的制定和培训要求实验室应与临床医护人员共同制订血培养的SOP文件,以确保临床医护人员能正确采集、保存、运送血培养标本。血培养标准操作规程应包括:采血指征、采血时机。采血标准流程包括采血部位、皮肤消毒方法、预防污染措施、采血次数与采血量等内容。
3.样本运送要求血培养标本应尽快送往实验室,从标本采集到运送到实验室不得超过2 h。
4.样本接收和处理实验室应制定血培养标本的验收规程,包括评估接收、拒收标准,实验室接收记录和接种流程等。定期统计以下数据:标本在送达实验室后要马上验收;拒收血培养标本的临床沟通文件及记录,被拒收的标本需立刻通知临床。下列情况血培养标本可以被接收,但必须通报临床血培养的标本并不理想:培养瓶中标本量不足;血培养的数量不够;只有单瓶血培养,血液仅在需氧瓶或厌氧瓶中培养。培养瓶中标本量是否合适,可以与未接种标本的同类培养瓶通过秤重或肉眼观察来判断。
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