细胞的有丝分裂指数（mitotic index, MI）即分裂期的细胞占总细胞数的百分率，常用来表示细胞增殖的程度。MI法在科研中常被用来表示药物对细胞增殖能力的影响。该方法的要点是用盖片培养法培养细胞，将细胞固定和染色后，镜下观察和计数1000个细胞中处于分裂期的细胞数，根据下述公式，计算MI。

【材料】

1．器材 细胞传代培养常用设备、预先清洗和灭菌处理的盖玻片、塑料培养皿、载玻片、封片用盖玻片、中性树胶、待培养的细胞。

2．试剂 甲醇、Giemsa染液。

【方法】

1．按细胞传代培养法培养细胞，制成浓度为1.0x10⁵/ml的细胞悬液。

2．将清洗和灭菌处理的盖玻片放到塑料培养皿中，摇匀细胞悬液后，接种于培养皿中。各皿中接种量相同。

3．分别于培养24,48和72小时后，从培养皿中取出盖玻片，在Hanks液中漂洗2～3次。

4．先用甲醇固定30分钟，再用Giemsa液染色。晾干后用中性树胶封片。

5．油镜或高倍镜下计数1000个细胞中的处于分裂期的细胞数。

6．计算MI按下列公式计算Ml;

【结果与分析】

根据分裂相细胞的特征计数分裂相细胞。分裂相细胞的主要特征是：①在分裂前期有棒状或发钗形深染的染色体形成。核膜仍原封未动，染色体蜷曲在核内；中心粒复制成双，并且分开，每一对中心粒移向细胞的一极，同时出现有丝分裂纺锤体的微管；②在分裂中期，核膜和核仁均消失。染色体移到细胞的赤道平面，每个染色体纵裂为2个染色单体；③在分裂后期，染色单体彼此分开，移向中心粒；④在分裂末期，特征是在子细胞中重又出现核。染色体恢复到原来的松螺旋状态，而核仁、染色质和核膜又出现。母细胞的赤道板平面发生收缩。确定前期和后期的界限是关键。将各组（对照组、药物组）的实验结果绘制成直方图或绘制成细胞分裂指数曲线进行比较。

【注意事项】

1．实验者必须熟练掌握各期分裂相细胞的形态特征。为避免判断标准不统一，实验自始至终最好由一人完成。如需两人以上观察时，事先应制订相同的标准，以减少误差。

2．细胞分裂指数曲线与细胞生长曲线趋势基本相似，但不完全相同。细胞增长达饱和密度并进入停止期后，细胞数量较多，而分裂相细胞可完全消失。

3．细胞在盖玻片上的密度常不均匀。在细胞密集区与稀少区，分裂相的细胞数目可能不同。计数时要选择密度近似区，以减少实验误差。