生理情况下，胚胎在输卵管内受精后发育至囊胚时，进入子宫进一步卵裂、孵育、着床。改变胚胎移植回子宫的时间，被认为是提高胚胎种植率的方法之一。移植用的胚胎，主要是受精后第2-3天的4-8细胞胚胎。其原因是培养液以及囊胚培养条件的限制造成的。近来出现的序贯培养液，为囊胚移植提供了有利条件，使第5天移植成为可能。

(1）培养条件：5%CO2、5%O2、90%N2培养系统降低了氧浓度，低氧环境使氧自由基产物减少，并中和培养基中的某些毒素。空气中20％的氧深度不是胚胎最适宜的环境，动物实验提示胚胎在相对低氧环境下种植率提高。

在囊胚培养中，培养基应满足胚胎在体外不同发育阶段生长的需要。胚胎卵裂早期需要微量的葡萄糖，胚泡晚期需要大量的葡萄糖，对丙酮酸的需求则相反。抗氧化牛黄酸对胚泡的发展是有价值的，次黄漂岭则是有害的。晚期桑甚胚和胚泡阶段，胚胎需要非必需氨基酸和必需氨基酸，大约在第3天胚胎基因开始活化并转录，若没有上述氨基酸，囊胚发育可形成阻滞。囊胚培养早期（第3天以前的卵裂阶段），胚胎放在简单介质（如G1）中生长，然后，当胚胎基因开始活化后，再将胚胎转移到合适介质如（G2中）培养，其中不仅包括含盐、能量底物和蛋白质，而且还有氨基酸、维生素和激素。目前囊胚培养基有多种，如G2、P2、Quinn囊胚培养基等。

(2）培养方法：

1)方法一：共培养法。

共培养法是指用单层细胞作为饲养层细胞，与胚胎共培养，模拟体内发育，促进囊胚的发育。目前，共培养所用的细胞有人输卵管壶腹部细胞、vero细胞（输卵管上皮细胞）、胎牛子宫成纤维细胞、牛输卵管上皮细胞、人子宫内膜细胞、卵丘细胞及卵巢癌细胞。人类的胚胎输卵管细胞作为饲养层细胞，有利于受精卵的生长（共培养），能够使胚胎的活力提高。

共培养对囊胚形成有重要意义，但在IVF领域存在较大争议，主要有以下几个原因：①细胞捐赠人可能的疾病传播以及利用动物细胞的伦理问题；②由于共培养系统较复杂，且作用机制尚未能够明确，对应用的有效性至今仍有争议；③由于其培养体系复杂，可能产生对胚胎的污染。近年来，共培养已逐渐被序贯培养所代替。

2）方法二：序贯培养法。

序贯培养法已取代联合培养系统。序贯培养注意到了人体外培养的胚胎在不同时间，对代谢需求各不相同，即移植前胚胎的营养成分需要改变。对不同发育时期的胚胎用不同的培养基，而每种培养基适合该时期胚胎发育的营养需要。Gardner发展了G1.2、G2.2序贯培养基，建立了这两种培养基的序贯培养系统。国内一些生殖中心也使用G1.2,G2.2序贯培养基培养人囊胚，取得了较满意的结果。

(3)囊胚培养步骤（其中前三天为胚胎培养）：

1)促排卵，卵子经4-6小时体外培养成熟。

2）体外受精，按100000个／ml密度将精子加入含有卵子的培养孔中，18-20小时后，根据原核及第二极体数检查受精情况。如果是通过ICSI，取卵子后2小时左右，用0.5mg/ml透明质酸酶将卵子外的卵丘消化，再用拉制的玻璃细管将卵子外的颗粒细胞去除。检查卵子的完好及成熟度，对有第一极体的核成熟卵子行ICSI。先将精子置于5％的聚乙烯吡咯烷酮中，经尾部制动后，尾端向前吸入微注射针中，转移至含HEPEs的HTF管中，保持卵子第一极体于6点或12点位置，由3点进针，抽吸少量胞质以确定卵膜穿透后，将精子置于卵胞质中央。ICSI后，卵子转移至HTF培养基中培养，次日检查受精情况。

3）第3天，观察胚胎，如果8细胞I一II级胚胎数大于3个，胚胎转入已经平衡过夜的囊胚培养皿内，评级高的胚胎集中培养，碎片含量较多或细胞大小不一的胚胎单个培养。第3天胚胎未达到上述标准者，当天移植回子宫。

4）检查囊胚形成率并进行评分，选择移植或冷冻培养获得的胚胎。取卵后第5天，评估胚胎质量，确定胚胎能否用于移植或冷冻。如果在第5天，不能形成囊胚，换液后胚胎继续培养1天。在第6天评估是否能用于移植和冷冻。迟于第7天上午形成囊胚者则不能再继续培养。