一、实训目标

1．掌握原子吸收法定量分析依据—朗伯比尔定律；

2．熟练掌握工作曲线法的使用。

二、实训原理

微量元素是维持人体生命活动不可缺少的物质。机体缺乏它们将引起许多疾病，其中以铜、锌、铁、钙、镁、锰与人体关系最为密切。
头发是微量元素锌的排泄器官之一，它不仅能反映人体中微量元素较长时间的积累状况，而且还能反映过去一段时间的营养和环境影响状况。因此，近年来利用头发分析作为某些疾病的诊断手段越来越受到人们的重视。而锌是生物体必需的微量元素，大部分分布在骨骼、肌肉、血浆和头发中。

测量人体中锌的方法，近年来有很多相关研究和报道，一般方法是抽取血液标本测定微量元素的方法，但容易引起病患者的痛苦。火焰原子吸收法测定人发中锌含量的研究，与其他方法比较，具有抗干扰、快速、经济、易掌握、分析准确等优点。

当条件一定时，原子吸收分光光度法的定量依据是：A=kcL。

人或动物的毛发，用湿消化法处理成溶液后，溶液对213.9nm波长的光（Zn元素的特征谱线）的吸光度与毛发中Zn的含量呈线性关系，故可直接用标准曲线法测定毛发中Zn的含量。

三、实训仪器与试剂

1．仪器
TAS-986火焰型原子吸收光谱仪；乙炔钢瓶、无油空气压缩机或者空气钢瓶；电热板；烧杯（100mL、500mL)；容量瓶（50mL8只，100mL1只）；l0mL量筒2个；吸量管(5mL)1支；吸量管（(1mL)1支；不锈钢剪刀1把；分析天平1台；玻璃棒1根；普通玻璃漏斗2个；锥形瓶2个。

2．试剂：

(1)0.5mg/mLZn的贮备标准溶液准确称取0.1679mg二水醋酸锌固体，用30mL去离子水将其溶解于100mL干燥洁净烧杯中，然后将其转移到100mL的洁净容量瓶中，最后用去离子水定容至刻度线，摇匀，盖上瓶塞，放好备用。

(2)l0μg/mLZn的标准溶液用1mL吸量管吸取0.5mg/mLZn的贮备标准溶液1mL于一个洁净的50mL容量瓶中，并用去离子水定容至刻度线，摇匀，盖上瓶塞，放好备用。

四、实训步骤

1．准备工作

清洗容量瓶等需要使用的玻璃仪器，晾干待用。

2．样品的采集与处理

用不锈钢剪刀剪取0.5g距发根1-3cm处的发样，于－500mL烧杯中用洗洁精搓洗发样，然后用自来水冲洗至无泡，这个过程重复3次，以保证洗去头发样品上的污垢和油腻。最后，发样用去离子水冲洗三次，置于烘箱中在100℃下干燥3h。

将烘干后的发样用不锈钢剪刀剪碎至每根0.5cm左右，然后于分析天平中称取0.2004g发样作为待分析样品。

将0.2004g待分析样品全部转移到锥形瓶内，用量筒分别量取4mL硝酸溶液和过氧化氢溶液，在锥形瓶上放置一个普通漏斗，防止消解过程出现暴沸，置于电热板上加热将待分析样品消解。同时，做一个空白对照。

消解完成后，将做空白对照实验的锥形瓶里面的液体全部转移至一个50mL的洁净容量瓶中，将装有分析样品的锥形瓶里面的液体全部转移至一个50mL的洁净容量瓶中，分别定容至刻度线，摇匀，盖上瓶塞，放好备用。

3．标准系列溶液的配制

在5只50mL洁净容量瓶中分别加入0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL10μg/mLZn的标准溶液，分别加去离子水定容至刻度线，摇匀，盖上瓶塞，放好备用。

4．测量

(1)按TAS-986火焰型原子吸收光谱仪操作步骤开动仪器，选定测定条件。

(2)安装Zn空心阴极灯。

(3)标准工作曲线的绘制用去离子水调节仪器的吸光度为0，按由稀到浓的次序测量标准系列溶液的吸光度，以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线。

（4)样品测定吸喷去离子水，以制备好的空白对照调节仪器的零点，测量未知试样的吸光度，平行测定3次。

5．结束工作

实验完毕，关闭电源。清洗玻璃仪器，清理工作台，罩上仪器防尘罩，填写仪器使用记录。

6．数据处理

(1)绘制标准曲线。

(2)由标准工作曲线计查的待分析样品中Zn的浓度。

(3）计算求出毛发中含Zn量。

五、注意事项

(1)实验前应仔细了解仪器的构造及操作，以便实验能顺利进行。

(2)实验前应检查通风是否良好，确保实验中产生的废气排出室外。

（3)使用微量注射器时，要严格按教师指导进行，防止损坏。

(4）试样的吸光度应在标准曲线的线性范围内，否则要进行适当的处理后，再进行测定。