紫外分光光度法怎么检测蛋白质？

蛋白质分子中常含酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸等芳香核结构，在紫外280nm波长处有最大吸收峰，故可用280nm波长的吸光度大小来测定蛋白质的含量。

本法对微量蛋白质的测定（测定蛋白质浓度范围为0.1~1.0g/L）操作简便、快速，不需要其他试剂，测定样品可以回收，样品中混有(NH4)2SO4或其他盐类也不干扰测定。

样品中若混有核酸或核苷酸时，由于核酸在280nm波长处也有光吸收，对蛋白质的测定有干扰作用，但核酸的最大吸收峰在260nm处，如同时测定260nm的光吸收，通过经验公式计算可以消除其对蛋白质测定的影响。另外，测定的样品蛋白质中酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸含量的差异也会对测定结果产生一定的影响。

试剂：

1、 生理盐水

2、 稀释血清 准确吸取血清0.1ml，置50ml容量瓶中，用生理盐水稀释至刻度。

操作：

1、用紫外分光光度计分别测定稀释血清的A280和A260值（用光径1cm的石英比色杯盛稀释血清，以生理盐水为空白对照），记录读数。

2、按下列经验公式计算蛋白质浓度

蛋白质浓度（g/L）=1.45A280-0.74A260