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器材与试剂
分光光度计,叶绿体色素提取所需器材。
方法与步骤
1. 提取叶绿素。
2. 测定光密度。
在1cm比色杯中,注入叶绿素提取液(浓度大时需稀释)。另以叶绿素提取介质作为参比溶液注入同样的比色杯中。根据实验要求,选用相应的波长(测总量选用652nm,测叶绿素a、b含量及总量选用663nm和645nm),在分光光度计上测定光密度。
3. 计算结果:把测定的光密度代入上述公式可求出比色杯中的叶绿素含量。如要计算样品中叶绿素含量时,需要考虑稀释因子。
样品中叶绿素含量(mgChl/g鲜重或mgChl/ml叶绿体)
D=比色杯中叶绿素含量×稀释倍数/样品量(g鲜重或ml叶绿体)
注意事项
用分光光度法测定物质含量时,分光光度计的波长调节要准确,参比杯与测定杯的透光率要一致。
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