一、原理

试样经除去蛋白质后，其中还原糖把铜盐还原为氧化亚铜，加硫酸铁后，氧化亚铜被氧化为铜盐，以高锰酸钾溶液滴定氧化作用后生成的亚铁盐，根据高锰酸钾消耗量，计算氧化亚铜含量，再查表得还原糖量。

二、试剂

除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯。

（1）硫酸铜（CuSO4·5H2O)。

(2)氢氧化钠（NaOH)。

(3）酒石酸钾钠（C4H4O6KNa·4H2O)。

(4）硫酸铁[Fe2（SO4）3]。

(5）盐酸（HC1)。

(6）碱性酒石酸铜甲液：称取34.639g硫酸铜（CuSO4·5H2O)，加适量水溶解，加0．5mL硫酸，再加水稀释至500mL，用精制石棉过滤。

(7）碱性酒石酸铜乙液：称取173g酒石酸钾钠与50g氢氧化钠，加适量水溶解，并稀释至500mL，用精制石棉过滤，储存于橡胶塞玻璃瓶内。

（8)氢氧化钠溶液（40g/L)：称取4g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。

(9）硫酸铁溶液（50g/L)：称取50g硫酸铁，加入200mL水溶解后，慢慢加入100mL硫酸，冷后加水稀释至1000mL。

（10）盐酸（3mol/L)：量取30mL盐酸，加水稀释至120mL。

（11）高锰酸钾标准溶液［c(1/5KMnO4)=0.1000mol/L]。

（12）精制石棉：取石棉先用盐酸（3mol/L)浸泡2一3d，用水洗净，再加氢氧化钠液体（400扩L）浸泡2一3d，倾去溶液，再用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。再以盐酸（3mol/L)浸泡数小时，以水洗至不呈酸性。然后加水振摇，使成细微的浆状软纤维，用水浸泡并储存于玻璃瓶中，即可作填充古氏坩埚用。

三、仪器

(1)25mL古氏坩埚或G4垂融坩埚。

(2）真空泵。

四、分析步骤

1.试样处理

(1)一般食品：称取粉碎后的固体试样约2.5一5g或混匀后的液体试样25一50g，精确至0.001g．置250mL容量瓶中，加水50mL，摇匀后加10mL碱性酒石酸铜甲液及4mL氢氧化钠溶液（40g/L)，加水至刻度，混匀。，静置30min,用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，取续滤液备用。

(2）酒精性饮料：称取约100g混匀后的试样漪确至0.01g，置于蒸发皿中，用氢氧化钠溶液（40g/L）中和至户性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后，移入250mL容量瓶中。加50mL水，混匀。

(3）含大量淀粉的食品：称取10一20g粉碎或混匀后的试样，精确至0.001g，置250mL容量瓶中，加200mL水，在45℃水浴中加热th，并时时振摇。冷后加水至刻度，混匀，静置。吸取200mL上清液置另一250mL容量瓶中。

(4）碳酸类饮料：称取约100g混匀后的试样，精确至0.01g，试样置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀后，备用。

2.测定

吸取50.00mL处理后的试样溶液，于400mL烧杯内，加入25mL碱性酒石酸铜甲液及25mL乙液，于烧杯上盖一表面皿，加热，控制在4min内沸腾，再准确煮沸2min，趁热用铺好石棉的古氏或G4垂融坩埚抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀，至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400mL烧杯中，加25mL硫酸铁溶液及25mL水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解，以高锰酸钾标准溶液[c（1/5KMnO4)=0.1000mol/L]滴定至微红色为终点。

同时吸取50mL水，加入与测定试样时相同量的碱性酒石酸铜甲液、乙液、硫酸铁溶液及水，按同一方法做空白试验。

3.结果计算

试样中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，按式（1）进行计算。

X＝（V一Vo）×c×71.54··················(1)

式中：X—试样中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量，mg;

V一一测定用试样液消耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL;

V0—试剂空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，mL;

c—高锰酸钾标准溶液的实际浓度，mol/L;

71.54—1mL1.000mol/L高锰酸钾溶液相当于氧化亚铜的质量，mg。

根据式中计算所得氧化亚铜质量，查附录，再计算试样中还原糖含量，按式（2）进行计算。

X＝m3/(m4×V/250×1000)×100．．．．．．．．．．．．．．．（2）

式中：X—试样中还原糖的含量，g/100g;

m3—查表得还原糖质量，mg;

m4—试样质量（体积）g或mL;

V—测定用试样溶液的体积，mL;

250—试样处理后的总体积，mL。

还原糖含量≥10g/100g时计算结果保留三位有效数字；还原糖含量＜10g/100g时，计算结果保留两位有效数字。

五、精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%

六、说明及注意事项

当称样量为5.0g时，直接滴定法的检出限为0.25g/100g，高锰酸钾滴定法的检出限为0.5g/100g。