(1)样品处理

①橘子汁、果味水、果子露汽水等：称取20.0～40.0g，放入100mL烧杯中，含二氧化碳试样加热驱除二氧化碳。

②配制酒类：称取20.O～40.0g，放100ml。烧杯中，加小碎瓷片数片，于水浴上加热驱除乙醇。

③硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等：称取5.00～10.00g已粉碎的样品，放入100mL小烧杯中，加水30mL，温热溶解，若样品pH较高，用柠檬酸溶液调pH到6左右。

④巧克力豆及着色糖衣制品：称取5.00～10.00g，放入100ml。小烧杯中，用水反复洗涤色素，到试样无色素为止，合并着色剂漂洗液为样品溶液。

(2)色素提取

①聚酰胺吸附法：样品溶液加柠檬酸溶液调节pn至6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入样品溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃=pH=4的水洗涤3～5次，然后用甲醇一甲酸混合溶液洗涤3～5次(含赤藓红的试样用②法处理)，再用水洗至中性，用乙醇一氨水一水混合溶液解吸3～5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL。经0.45μm滤膜过滤，取10μl进高效液相色谱仪。

②液一液分配法(适用于含赤藓红的试样)：将制备好的样品溶液放入分液漏斗中，加2mL盐酸、三正辛胺正丁醇溶液(5％)10～20mL，振摇提取，分取有机相，重复提取，至有机层无色。合并有机相，用饱和硫酸钠溶液洗2次，每次10ml，分取有机相，放蒸发皿中，水浴加热浓缩至10mL，转移至分液漏斗中，加60ml正己烷，混匀，加氨水提取2～3次，每次5mL。合并氨水溶液层(含水溶性酸性色素)，用正己烷洗2次，氨水层加乙酸调成中性，水浴加热蒸发至近干，加水定容至5mL。经滤膜0.45μm滤膜过滤，取10μL进高效液相色谱仪。

(3)高效液相色谱参考条件

①柱：YWG—C1810μm不锈钢柱4.6mm(i.d)×250mm。

②流动相：甲醇：乙酸铵溶液(pH=4，0.02mol／L)。

③梯度洗脱：甲醇：20％～35％，3％／min，35％～98％，9％／min，98％继续6min。

④流速：1mL／min。

⑤紫外检测器，波长254nm。

(4)测定 取相同体积样液和合成着色剂标准使用液分别注入高效液相色谱仪，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。

5．结果计算

试样中着色剂的含量按下式进行计算。

X=A*1000/m*V₂/V₁*1000*1000

式中 x---样品中着色剂的含量，g/kg

A——样液中着色剂的质量，μg

V₂——进样体积，mL

V₁——样品稀释总体积，mL

m——样品质量，g

计算结果保留两位有效数字。

6．精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的10％。