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高效液相法的原理、试剂和溶液及所需仪器

发布时间:2014-10-27 00:00 作者:中国标准物质网 阅读量:1484

1.原理

食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液一液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性与峰面积比较进行定量。

适用于食品中合成着色剂的测定。

标准的检出限:新红5ng、柠檬黄4ng、苋菜红6ng、胭脂红8ng、日落黄7ng、赤藓红18ng、亮蓝26ng,当进样量相当O.025g时,检出浓度分别为0.2、0.16、0.24、0.32、0.28、0.72、1.04mg/kg。

2.试剂及溶液

(1)正己烷;盐酸;乙酸;甲醇经0.5μm滤膜过滤;聚酰胺粉(尼龙6):200目过筛;饱和硫酸钠溶液;硫酸钠溶液(2g/L)。

(2)乙酸铵溶液(0.02mol/L)称取1.54g乙酸铵,加水至1000ml,溶解,经0.45μm滤膜过滤。

(3)氨水量取氨水2mL,加水至100ml,混匀

(4)氨水一乙酸铵溶液(0.02mol/L) 量取氨水0.5mL,加乙酸铵溶液(O.02mol/L)至1000ml,混匀。

(5)甲醇一甲酸(6+4)溶液 量取甲醇60ml,甲酸40ml,混匀。

(6)柠檬酸溶液称取20g柠檬酸(C6H8O7·H2O),加水至100mL,溶解混匀。

(7)无水乙醇一氨水一水(7+2+1)溶液 量取无水乙醇70mL,氨水20mL,水10mL,混匀。

(8)三正辛胺正丁醇溶液(5%) 量取三正辛胺5mL,加正丁醇至100mL,混匀。

(9)pH6的水 水加柠檬酸溶液调pH到6。

(10)合成着色剂标准溶液 准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝、靛蓝各0.100g,置100mL容量瓶中,加pH6水至刻度。配成水溶液(1.00mg/mL)。

(11)合成着色剂标准使用液 临用时上述溶液合成着色剂标准溶液时,加水稀释20倍,经0.45μm滤膜过滤。配成每毫升相当50.0μg的合成着色剂。

3.仪器

(1)高效液相色谱仪。

(2)带紫外检测器,波长254nm。

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