北京普天同创生物科技有限公司
1 范围
本标准规定了出口禽蛋中泰乐菌素残留量检验的抽样、制样和杯碟测定法。
本标准适用于出口鸡蛋、鸭蛋、冰全蛋中泰乐菌素残留量的检验。
2 抽样和制样
2.1 检验批
以不超过1020箱(一个车皮)为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量
按批次,每百箱取样三箱,每增百箱增取一箱,尾数不足百箱但超过30箱的增抽一箱。
2.3 抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取2枚(冰全蛋不少于100g)作为原始样品,抽取的原始样品总量不少于1 kg。放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送交实验室。
2.4 试样制备
从原始样品中,随机分出一半(不少于500 g),鲜蛋需去壳。将蛋黄和蛋白于混合器中充分混匀,装入清洁容器内,作为试样。加封后标明标记。
2.5 试样保存
将试样于-18℃以下保存。
注:在抽样及制样的操作过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3 测定方法
3.1 方法提要
试样经加水均质、离心后,取上清液,进行杯碟法测定。利用被测样液中的泰乐菌素残留与藤黄微球菌的作用产生抑菌圈,根据产生抑菌圈的大小用标准曲线法进行定量测定。
3.2 试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水。
3.2.1 缓冲液(pH8.0±0.1):称取13.3g无水磷酸二氢钾加入900 mL水溶解,再加入100 mL 6.2%氢氧化钾溶液,混匀,于121℃高压灭菌15 min。
3.2.2 生理盐水:称取8.5g氯化钠,溶于1000mL水中,于121℃高压灭菌15 min。
3.2.3 泰乐菌素标准品:820 ug/mg,由日本和光纯药工业株式会社提供,或等效品。
3.2.4 泰乐菌素标准贮备液:称取适量的泰乐菌素标准品(精确到0.1mg),先用少量甲醇溶解,再用水定容至1 000 mL,使其浓度达1 000 ug/mL,置4℃冰箱保存,可使用8天。
3.2.5 泰乐菌素标准工作液:吸取一定量泰乐菌素标准贮备液,分别用缓冲液稀释成浓度为0.03,0.1,0.2,0.4,0.8 ug/mL的标准工作液。需当天配制和使用。
3.2.6 试验菌种:藤黄微球菌(Micrococcus luteus),菌种号CMCC 28001,中国药品生物制品检定所提供。
3.2.7 培养基1。
3.2.8 培养基2。
3.2.9 培养基3。
3.3 仪器和设备
3.3.1 培养皿:内径90 mm,底部平整光滑的玻璃皿或塑料皿,具陶瓦盖。
3.3.2 牛津杯:不锈钢圆筒,外径(8.04~0.1) mm、内径(6.0±0.1) mm、高度(10.0±0.1)mm。
3.3.3 游标卡尺:测量范围0~200 mm、精度0.02 mm,或抑菌圈测量仪。
3.3.4 均质器;不低于10000r/min。
3.3.5 离心机:不低于8 000 r/min。
3.3.6 恒温培养箱:(30±1)℃,搁板应保持水平。
3.3.7 高压灭菌器。
3.3.8 恒温水浴锅:恒温±1℃。
文章来源:《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》
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