1 范围

本标准规定了出口肉及肉制品中粘菌素残留量检验的抽样、制样和杯碟测定方法。

本标准适用于出口鸭肉中粘菌素残留量的检验。

2 抽样和制样

2.1 检验批

以不超过2 500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

2.2 抽样数量

2.3 抽样方法

按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取500 g(或一袋)作为原始样品，抽取的原始样品总量不少于2 kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。

2.4 试样制备

从所取回的原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入绞碎机中绞碎，充分混匀。用四分法缩分至不少于500 g作为试样。装入清洁容器内，加封后标明标记。

2.5 试样保存

将试样于-18℃以下冷冻保存。

注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

3 测定方法

3.1 方法提要

用磷酸盐缓冲液抽提试样中残留的粘菌素，经均质、离心，取上清液进行杯碟法测定。利用样液中的残留粘菌素与支气管败血性博代氏杆菌的作用，根据产生抑菌圈的大小用标准曲线法定量。

3.2 试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

3.2.1 粘菌素甲基磺酸钠标准品：已知效价标准品。1 ug相当于0.613 ug粘菌素。

3.2.2 缓冲液Ⅰ：pH6.0±0.1。称取80.0g无水磷酸二氢钾溶于700 mL水中，另取20.0g无水磷酸氢二钾溶于300 mL水中，两者混合，于121℃高压灭菌15 min。

3.2.3 缓冲液Ⅱ：pH6.0±0.1。称取80.0g无水磷酸二氢钾溶于700 mL水中，另取20.0g无水磷酸氢二钾溶于300 mL水中，两者混合。称取铁氰化钾以0.2％比例溶解于该溶液中。

3.2.4 试验菌种：支气管败血性博代氏杆菌(Bordetella bronchiseptica)，由美国标准菌株收藏中心提供，菌株号ATCC 4617。

3.2.5 粘菌素标准储备液：称取适量的粘菌素甲基磺酸钠标准品(精确到0.1mg)，用缓冲液I溶解并制备成浓度为1000ug/mL的粘菌素标准储备液。置4℃保存，可使用8天。

3.2.6 粘菌素标准工作液：分别吸取一定量粘菌素标准储备液，用缓冲液I稀释成浓度为0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2 ug/mL的粘菌素标准工作液。需当日配制和使用。

3.2.7 培养基I。

3.2.8 培养基Ⅱ。

3.2.9 培养基Ⅲ。

3.3 仪器和设备

3.3.1 培养皿：内径90 mm，底部平整光滑的玻璃皿或塑料皿，具陶瓦盖。

3.3.2 牛津杯：不锈钢圆筒，外径(8.0±0.1) mm，内径(6.0±0.1) mm，高度(10.0±0.1) mm。

3.3.3 游标卡尺：测量范围0～200 mm，精度0.02 mm，或抑菌圈测量仪。

3.3.4 绞碎机：电动。

3.3.5 均质器：不低于10000r/min。

3.3.6 离心机：不低于4 000r/min。

3.3.7 恒温培养箱：(36±1)℃，搁板应保持水平。

3.3.8 高压灭菌器。

3.3.9 恒温水浴锅：恒温±1℃。

相关链接：出口肉及肉制品中竹桃霉素残留量检验方法（二）

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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