1 范围

本标准规定了出口肉品中卡那霉素残留量检验的抽样、制样和杯碟测定法。

本标准适用于出口禽肉中卡那霉素残留量的检验。

2 抽样和制样

2.1 检验批

以不超过2500件为一检验批。

同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

2.2 抽样数量

2.3 抽样方法

按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品，抽取的原始样品总量不少于2 kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记及时送交实验室。

如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2 kg者，则可用灭菌刀具在抽出的包件中，每件割取不少于100 g样品，混合后置清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的总量不少于2 kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。

2.4 试样制备

从取回的原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放入绞碎机中绞碎，充分混匀。用四分法缩分出不少于500 g作为试样。装入清洁容器内，加封后标明标记。

2.5 试样保存

将试样于-18℃以下冷冻保存。

注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

3 测定方法

3.1 方法提要

用磷酸盐缓冲液抽提试样中残留的卡那霉素，经均质、离心，取上清液进行杯碟法测定。利用被测定样液中的残留卡那霉素与枯草杆菌的作用，产生抑菌圈，从抑菌圈大小用标准曲线法进行定量测定。

3.2 试剂和材料

除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

3.2.1 卡那霉素标准品：775 ug/mg，由中国药品生物制品检定所提供。

3.2.2 缓冲液I (pH6.0±0.1):称取3.5g无水磷酸二氢钾及16.73g无水磷酸氢二钾溶于水中，定容1 000 mL,121℃高压灭菌15 min。

3.2.3 缓冲液I (pH8.0±0.1):称取13.3g无水磷酸二氢钾及6.2g氢氧化钾溶于水中，定容1000 mL,121℃高压灭菌15 min。

3.2.4 缓冲液11(PH7.9±0.1):称取0.523g无水磷酸二氢钾及16.73g无水磷酸氢二钾溶于水中，定容1000 mL，121℃高压灭菌15 min。

3.2.5 试验菌种：枯草芽孢杆菌(Bacillus suhtilis)，由中国药品生物制品检定所提供，菌株号63501。

3.2.6 生理盐水：称取8.5g氯化钠，溶解于1000 mL水中，121℃高压灭菌15 min。

3.2.7 卡那霉素标准储备液：准确称取适量的卡那霉素标准品，精确到±0.1mg，用缓冲液I(3.2.2)溶解并定容至1000 ug/mL，置4℃冰箱保存，可使用一个月。

3.2.8 卡那霉素标准工作液：吸取一定量卡那霉素标准储备液，用缓冲液1(3.2.3)稀释成0.25、0.5、1.0、2.0ug/mL的标准工作液。以上溶液均须当日配制和使用。

3.2.9 培养基

保存及增菌用培养基。

基层及菌种用培养基。

3.3 仪器和设备

3.3.1 培养皿：内径90 mm，底部平整光滑的玻璃皿或塑料皿，具陶瓦盖。

3.3.2 牛津杯：不锈钢管，外径(8.0±0.1)mm，内径(6.0±0.1)mm ,高度(10.0±0.1)mm。

3.3.3 游标卡尺：测量范围0～200 mm，精度0.02mm。

3.3.4 纹碎机：电动。

3.3.5 均质器：不低于10000 r/min。

3.3.6 离心机：不低于4000 r/min。

3.3.7 恒温培养箱：(36±1)℃，搁板应保持水平。

3.3.8 高压灭菌器。

3.3.9 恒温水浴锅。

3.3.10 其他：实验室常用玻璃器皿。

相关链接：出口肉品中育畜磷残留量检验方法（二）

文章来源：《食品化妆品检验卷无机元素和放射元素及其他检测方法》

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