大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，大肠菌群是作为粪便污染的指标菌，主要是以该菌群的检出情况来判定食品是否被粪便污染。大肠菌群检出量的多少，表明被粪便污染的程度高低。实际工作中大肠菌群检测方法种类繁多、方法各异，纸片法是在实践工作中研制并不断完善的一种快速简便方法，它将乳糖、蛋白陈等营养成分加上溴甲酚紫、氯化三苯甲基四氮唑(TTC)作为指示剂，浸纸片，37℃或40℃烘干，无菌封装，置冰箱备用。

1．速测范围

本品适用于需要对大肠菌群准确计数的样品，如消毒牛乳、冷饮和调味品等。在计数方面，比传统的 MPN值法(最大可能数法)更加准确。与国标法相对应，将原来几步完成的试验简化为一步，时间由1周左右缩短为十几个小时，无需制备培养基和清洗器皿，适合生产企业自检和卫生检验部门使用。

2．速测步骤

(1)样品原液检测。对含菌量少的液体样品(如消毒牛乳等)可直接用原液检测。将测试片平放在工作台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL，均匀加到中央的圆圈内，再轻轻将上盖膜放下，静置5min。然后从中间向周围轻轻推刮，使液体在圆圈内均匀分布，并将气泡赶走。

(2)样品稀释液检测。对于含菌量多的样品，取样品25g(或mL)放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内，充分振摇后成为1：10的稀释液。用1mL灭菌吸管吸取1：10的稀释液1mL，注入含有9mL无菌水的试管内，振摇后成为1：100的稀释液，以此类推，做出1：1000等稀释度的稀释液。选3个稀释度进行检测。用灭菌吸管吸取稀释液 1mL，按样品原液检测方法进行检测。

(3)培养。将加样的测试片放入自封袋中，平放在37℃培养箱内培养15～24h。

(4)计数。在测试片培养基上显红色斑点，周围有黄晕并且有气泡者为大肠菌群阳性菌落。如果只做原液，则每个测试片上的阳性菌落数即相当于每毫升大肠菌群数；如同时做3个稀释度，则选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数，然后乘以稀释倍数即为样品中每克(毫升)含有大肠菌群数。

3．说明

如果样品的酸碱度在pH7.0以下时，应先用灭过菌的碱性溶液(如0.01mol/LNaOH)调节到pH7.0～8.0，否则接种后培养基马上变黄。

相关链接：菌落总数的速测技术—纸片法

文章来源：《食品安全快速检测技术》

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